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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » pFast bac重组质粒转化DH10 bac 问题
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sundan1111

铜虫 (初入文坛)

[求助] pFast bac重组质粒转化DH10 bac 问题 已有2人参与

最近将测序正确的pFast bac重组质粒转化DH10 bac 感受态细胞，稀释到10-5,10-6 涂含有卡那霉素，四环素，庆大霉素，X-gal,IPTG的LB 平板，结果全是蓝斑，尝试很多次都是一样的结果，各位学者能否帮忙分析一下，先谢过啦！
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1楼 2015-11-28 19:50:46
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dalian0725

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
挑菌再划线，三四次就OK
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2楼2015-11-28 21:21:52
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sundan1111

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dalian0725 at 2015-11-28 21:21:52
挑菌再划线，三四次就OK

谢谢你，但是有个问题长出来的都是蓝斑，也可以挑菌吗，蓝斑是不是就是没转进去呀？
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3楼2015-11-30 21:21:25
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sundan1111

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dalian0725 at 2015-11-28 21:21:52
挑菌再划线，三四次就OK

谢谢，是不是将转化完的菌划线呀？
赞一下 回复此楼
4楼2015-11-30 21:23:09
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hong_lue

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

做出来了吗？白半才可以复筛，本来重组就不高
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5楼2016-02-25 13:23:58
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相惜。

新虫 (初入文坛)
我最近做的长的也都是蓝斑，是不是没转座成功啊，求解答

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6楼2017-04-02 19:48:47
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zsummay

新虫 (初入文坛)
涂板的菌液太多，没看见白斑

发自小木虫IOS客户端
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7楼2017-04-02 20:08:57
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