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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 资料求助 » MTT细胞染色法求高手指导
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明贝儿

金虫 (正式写手)

[求助] MTT细胞染色法求高手指导 已有1人参与

用MTT给加药后72h的细胞染色，染色前显微镜下可以明显看到药物的大概的IC50值，但是加每孔50ulMTT染色后（不吸旧的培养基），温育4h，每孔加50ul的DMSO,摇晃1h左右，发现加药的孔和不加药的孔颜色一样深（都很浅），不知道怎么了。急求指导! ! !急求指导! ! !急求指导! ! !
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1楼 2015-11-24 22:16:31
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mlbiosci

新虫 (正式写手)
MT为什麽不吸出来

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2楼2015-11-24 22:21:24
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明贝儿

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by mlbiosci at 2015-11-24 22:21:24
MT为什麽不吸出来

我把握不好度，就是加药的时候用8个枪头的排插页总是把细胞吸出来，加药后细胞死亡 了不是更容易吸出来了，所以没吸出。
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3楼2015-11-25 10:10:58
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mlbiosci

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 明贝儿 at 2015-11-25 10:10:58
我把握不好度，就是加药的时候用8个枪头的排插页总是把细胞吸出来，加药后细胞死亡 了不是更容易吸出来了，所以没吸出。...

应该是吸出来的。悬浮细胞吗

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4楼2015-11-25 11:37:03
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明贝儿

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by mlbiosci at 2015-11-25 11:37:03
应该是吸出来的。悬浮细胞吗
...

不是吧，就是做药物的细胞毒性。死的细胞会浮起来。请问你是做药物的吗？
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5楼2015-11-25 16:50:47
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mlbiosci

新虫 (正式写手)
能浮起来为什么不吸掉

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6楼2015-11-25 20:32:44
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说你呢

新虫 (小有名气)
贴壁细胞弃上清，不用用枪吸，直接倒掉就行，显色是与活细胞作用，与飘浮的死细胞无关

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7楼2015-11-25 20:42:39
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mlbiosci

新虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by mlbiosci at 2015-11-25 20:32:44
能浮起来为什么不吸掉

我说的是加DMSO之前

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8楼2015-11-25 20:46:46
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柳叶刀方恨少

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
明贝儿: 金币+10 2015-11-28 11:37:10
MTT染色前一般不需要弃培养基，因为药物一般与MTT没有反应，但是如果是用高血清培养基培养细胞时建议染色前弃培养基；MTT染色后要弃培养基，96孔板倾斜，大枪头套上10ul小枪头贴着孔壁小心吸取。具体注意事项参考：丁香园论坛http://www.dxy.cn/bbs/topic/11483398。
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9楼2015-11-28 09:30:38
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51mimi

新虫 (小有名气)
同问，我也是这个问题，~(>_<~，楼主如果解决了，分享一下经验。

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10楼2015-11-28 11:22:45
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