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生物小白一枚，导师让分离产表面活性剂的菌，环境样品，用葡萄糖和酵母为底物，为了接近初始环境，体系中有较高盐浓度（总盐20g/L),富集培养后涂板。剩余的菌液5000转离心20分钟，除去菌体（想测下代谢产物中是否有表面活性剂产生） 按实验室惯例是加入6M的盐酸酸沉，沉淀烘干 乙醚浸提。可是我的菌液除菌后加酸没有任何沉淀，加碱调PH呈碱性后才有胶状沉淀（如图），小白的我以为是多糖类物质，可是后来发现多糖是该用醇沉淀，于是取了上清液加乙醇，结果发现上清加乙醇后确实有沉淀，反推胶状沉淀应该不是多糖。那么问题来了，先前加碱以后的胶状沉淀会是什么呢？是蛋白质么？！可是量还不少呢。有高人知道这是怎么回事么？求指教！ IMG_1935.JPG |
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傅煜雯20072楼2015-11-24 13:07:40
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virty76
铁杆木虫 (著名写手)
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- 专业: 微生物生理与生物化学
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6楼2015-11-28 08:20:36
7楼2015-11-28 08:52:53
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表面活性剂的提取大部分文献上可以找到，不外乎离心去菌体、调节ph，4摄氏度过夜沉淀，离心，萃取，旋转蒸发后，用甲醇或者无机盐容易洗涤到三角瓶中。 筛菌:土样悬液制备，放大处理，血平板初筛+表面张力仪复筛，得到菌株，粗产物提取，粗产物分析TLC分析/FT-IR分析，精制产物MS或者NMR分析，发酵条件优化，菌株/发酵产物应用。产表面活性剂基因定位，基因导入常见菌株后的发酵情况。表面活性剂的发酵(大型发酵罐，或应用于工业化生产)。好了 做完你就可以博士毕业了 祝好。 发自小木虫Android客户端 |
8楼2015-11-29 20:48:10
