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汕头大学海洋科学接受调剂
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hanwei1150

铁虫 (初入文坛)

[求助] 菌种活化 已有4人参与

大肠杆菌基因工程菌,摇瓶生长良好,上发酵罐不生长,怀疑菌种活化的问题,请有经验人员提供可行的菌种活化方案和理论指导,谢谢。
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HighdensityfermentationofrecombinantE.coli
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a2703521

金虫 (小有名气)

123

别一来就忙着叫人换罐子,先找找上罐过程参数和培养参数,不是什么问题都能换换罐子就可以解决的,再说哪来那么多罐子给你天天换
3楼2015-11-23 13:44:15
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普通回帖

tams137

铁虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这种瓶里长灌上不长的情况都是罐子的培养参数有问题,你可以换个罐子,如果不能换罐子,换培养参数
2楼2015-11-23 11:59:12
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生物百科助手

新虫 (初入文坛)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你上罐的体积,培养基,培养温度是多少?摇瓶涨到多少OD值
4楼2015-11-23 13:54:51
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
各种问题都有可能哦,唯独罐子的问题可能性最小哦
1.菌种活化,是将甘油管的菌种,在扛性平皿上划线,培养过夜,挑取单菌落转接试管或摇瓶。
2.摇瓶菌种接罐不长可能性很多,比如你的培养基,接进去要有适应期,刚开始肯定不长,过2,3个小时才开始长,在比如你的培养基不合适生长,在比如培养条件比如PH,温度,溶氧等。大概就这些吧,罐子影响不大。祝顺利
5楼2015-11-23 13:55:08
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hanwei1150

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by hc-material at 2015-11-23 13:55:08
各种问题都有可能哦,唯独罐子的问题可能性最小哦
1.菌种活化,是将甘油管的菌种,在扛性平皿上划线,培养过夜,挑取单菌落转接试管或摇瓶。
2.摇瓶菌种接罐不长可能性很多,比如你的培养基,接进去要有 ...

摇瓶生长正常,培养基没问题,罐子培养参数也没问题,只是接种到罐子不生长,上罐成功后后保存的菌种后续就没有了这种问题,很什么原因?还有我想问大肠杆菌菌种活化的理论知识以及有效的方法,谢谢!
HighdensityfermentationofrecombinantE.coli
6楼2015-11-23 15:16:34
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hanwei1150

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by hc-material at 2015-11-23 13:55:08
各种问题都有可能哦,唯独罐子的问题可能性最小哦
1.菌种活化,是将甘油管的菌种,在扛性平皿上划线,培养过夜,挑取单菌落转接试管或摇瓶。
2.摇瓶菌种接罐不长可能性很多,比如你的培养基,接进去要有 ...

PH,温度,溶氧,培养基这些都没问题
HighdensityfermentationofrecombinantE.coli
7楼2015-11-23 15:17:35
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hanwei1150

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by tams137 at 2015-11-23 11:59:12
这种瓶里长灌上不长的情况都是罐子的培养参数有问题,你可以换个罐子,如果不能换罐子,换培养参数

大肠杆菌的培养条件很简单啊,pH是中性,温度37,有什么不合适呢?或者您提供一个更好的条件,谢谢!
HighdensityfermentationofrecombinantE.coli
8楼2015-11-23 15:19:48
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hanwei1150

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 生物百科助手 at 2015-11-23 13:54:51
你上罐的体积,培养基,培养温度是多少?摇瓶涨到多少OD值

50L发酵罐,37度培养,摇瓶长到6左右,请问可以吗?
HighdensityfermentationofrecombinantE.coli
9楼2015-11-23 15:21:47
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by hanwei1150 at 2015-11-23 15:19:48
大肠杆菌的培养条件很简单啊,pH是中性,温度37,有什么不合适呢?或者您提供一个更好的条件,谢谢!...

切,培养条件也包括培养基的的C.N,氮源的种类,通气,搅拌等,谁说的只是PH和温度啊啊
10楼2015-11-23 15:56:38
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