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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 菌种活化
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hanwei1150

铁虫 (初入文坛)

[求助] 菌种活化 已有4人参与

大肠杆菌基因工程菌，摇瓶生长良好，上发酵罐不生长，怀疑菌种活化的问题，请有经验人员提供可行的菌种活化方案和理论指导，谢谢。
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HighdensityfermentationofrecombinantE.coli
1楼 2015-11-23 11:38:45
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a2703521

金虫 (小有名气)

123
别一来就忙着叫人换罐子，先找找上罐过程参数和培养参数，不是什么问题都能换换罐子就可以解决的，再说哪来那么多罐子给你天天换
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3楼2015-11-23 13:44:15
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普通回帖

tams137

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这种瓶里长灌上不长的情况都是罐子的培养参数有问题，你可以换个罐子，如果不能换罐子，换培养参数
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2楼2015-11-23 11:59:12
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生物百科助手

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你上罐的体积，培养基，培养温度是多少？摇瓶涨到多少OD值
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4楼2015-11-23 13:54:51
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
各种问题都有可能哦，唯独罐子的问题可能性最小哦
1.菌种活化，是将甘油管的菌种，在扛性平皿上划线，培养过夜，挑取单菌落转接试管或摇瓶。
2.摇瓶菌种接罐不长可能性很多，比如你的培养基，接进去要有适应期，刚开始肯定不长，过2,3个小时才开始长，在比如你的培养基不合适生长，在比如培养条件比如PH，温度,溶氧等。大概就这些吧，罐子影响不大。祝顺利
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5楼2015-11-23 13:55:08
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hanwei1150

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by hc-material at 2015-11-23 13:55:08
各种问题都有可能哦，唯独罐子的问题可能性最小哦
1.菌种活化，是将甘油管的菌种，在扛性平皿上划线，培养过夜，挑取单菌落转接试管或摇瓶。
2.摇瓶菌种接罐不长可能性很多，比如你的培养基，接进去要有 ...

摇瓶生长正常，培养基没问题，罐子培养参数也没问题，只是接种到罐子不生长，上罐成功后后保存的菌种后续就没有了这种问题，很什么原因？还有我想问大肠杆菌菌种活化的理论知识以及有效的方法，谢谢！
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HighdensityfermentationofrecombinantE.coli
6楼2015-11-23 15:16:34
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hanwei1150

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by hc-material at 2015-11-23 13:55:08
各种问题都有可能哦，唯独罐子的问题可能性最小哦
1.菌种活化，是将甘油管的菌种，在扛性平皿上划线，培养过夜，挑取单菌落转接试管或摇瓶。
2.摇瓶菌种接罐不长可能性很多，比如你的培养基，接进去要有 ...

PH，温度,溶氧，培养基这些都没问题
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HighdensityfermentationofrecombinantE.coli
7楼2015-11-23 15:17:35
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hanwei1150

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by tams137 at 2015-11-23 11:59:12
这种瓶里长灌上不长的情况都是罐子的培养参数有问题，你可以换个罐子，如果不能换罐子，换培养参数

大肠杆菌的培养条件很简单啊，pH是中性，温度37，有什么不合适呢？或者您提供一个更好的条件，谢谢！
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HighdensityfermentationofrecombinantE.coli
8楼2015-11-23 15:19:48
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hanwei1150

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 生物百科助手 at 2015-11-23 13:54:51
你上罐的体积，培养基，培养温度是多少？摇瓶涨到多少OD值

50L发酵罐，37度培养，摇瓶长到6左右，请问可以吗？
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HighdensityfermentationofrecombinantE.coli
9楼2015-11-23 15:21:47
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by hanwei1150 at 2015-11-23 15:19:48
大肠杆菌的培养条件很简单啊，pH是中性，温度37，有什么不合适呢？或者您提供一个更好的条件，谢谢！...

切，培养条件也包括培养基的的C.N，氮源的种类，通气，搅拌等，谁说的只是PH和温度啊啊
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10楼2015-11-23 15:56:38
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