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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

OD6菌种都老化了,种子OD控制在1到2之间。
11楼2015-11-23 15:57:32
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hanwei1150

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by hc-material at 2015-11-23 15:56:38
切,培养条件也包括培养基的的C.N,氮源的种类,通气,搅拌等,谁说的只是PH和温度啊啊...

培养基,通气,搅拌应该没问题,因为表达别的蛋白都可以
HighdensityfermentationofrecombinantE.coli
12楼2015-11-23 16:11:13
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生物百科助手

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
9楼: Originally posted by hanwei1150 at 2015-11-23 15:21:47
50L发酵罐,37度培养,摇瓶长到6左右,请问可以吗?...

你接种量是多少啊,摇瓶涨到6左右可以的啊,你说的不涨是指一点都不涨吗?
13楼2015-11-24 13:25:11
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hanwei1150

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 生物百科助手 at 2015-11-24 13:25:11
你接种量是多少啊,摇瓶涨到6左右可以的啊,你说的不涨是指一点都不涨吗?...

有的一点不长,有的长一两个小时后不再生长
HighdensityfermentationofrecombinantE.coli
14楼2015-11-24 14:16:29
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二在奔三路上

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

判断是摇瓶菌种的问题还是发酵罐的问题,可以做平行交叉试验,找出问题才好解决,个人认为,跟罐关系不大
15楼2015-12-29 09:46:45
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发酵小牛马

铁虫 (小有名气)

我们也是同样的问题,上罐菌种是甘油管到平板,平板挑菌落到小摇瓶,小摇瓶到大摇瓶,大摇瓶上罐,上罐时出现生长延迟、生长一段时间后不长了补种也不长等情况,这些异常情况出现的频次不少(异常出现的批次参数不一样,有放了很久的种子,有培养基缺失成分批次),相关操作人员换衣是菌种传代次数过多导致菌体生长异常,但是我们有利用二代平板成功过多批次。为了达到接种量所以多加了一级摇瓶,如果完全是这个原因那大生产没法开展了,多级种子更不敢试了!苦恼!
16楼2026-01-20 15:36:41
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发酵小牛马

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by hanwei1150 at 2015-11-23 15:16:34
摇瓶生长正常,培养基没问题,罐子培养参数也没问题,只是接种到罐子不生长,上罐成功后后保存的菌种后续就没有了这种问题,很什么原因?还有我想问大肠杆菌菌种活化的理论知识以及有效的方法,谢谢!...

同样的情况,种子接到罐上后快20个小时才长,下罐样品镜检有目的菌和杂菌,因为上罐初始条件是微压,会不会还是罐子密封性不好,染了菌,染得菌生长慢,抑制了目的菌的生长,后续生长过程中,出现了两者共存的现象,还有就是罐子微压是容易染菌么?
17楼2026-01-26 11:33:48
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