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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 菌种活化
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

OD6菌种都老化了，种子OD控制在1到2之间。
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11楼2015-11-23 15:57:32
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hanwei1150

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by hc-material at 2015-11-23 15:56:38
切，培养条件也包括培养基的的C.N，氮源的种类，通气，搅拌等，谁说的只是PH和温度啊啊...

培养基，通气，搅拌应该没问题，因为表达别的蛋白都可以
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HighdensityfermentationofrecombinantE.coli
12楼2015-11-23 16:11:13
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生物百科助手

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by hanwei1150 at 2015-11-23 15:21:47
50L发酵罐，37度培养，摇瓶长到6左右，请问可以吗？...

你接种量是多少啊，摇瓶涨到6左右可以的啊，你说的不涨是指一点都不涨吗？
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13楼2015-11-24 13:25:11
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hanwei1150

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 生物百科助手 at 2015-11-24 13:25:11
你接种量是多少啊，摇瓶涨到6左右可以的啊，你说的不涨是指一点都不涨吗？...

有的一点不长，有的长一两个小时后不再生长
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HighdensityfermentationofrecombinantE.coli
14楼2015-11-24 14:16:29
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二在奔三路上

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

判断是摇瓶菌种的问题还是发酵罐的问题，可以做平行交叉试验，找出问题才好解决，个人认为，跟罐关系不大
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15楼2015-12-29 09:46:45
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发酵小牛马

铁虫 (小有名气)
我们也是同样的问题，上罐菌种是甘油管到平板，平板挑菌落到小摇瓶，小摇瓶到大摇瓶，大摇瓶上罐，上罐时出现生长延迟、生长一段时间后不长了补种也不长等情况，这些异常情况出现的频次不少（异常出现的批次参数不一样，有放了很久的种子，有培养基缺失成分批次），相关操作人员换衣是菌种传代次数过多导致菌体生长异常，但是我们有利用二代平板成功过多批次。为了达到接种量所以多加了一级摇瓶，如果完全是这个原因那大生产没法开展了，多级种子更不敢试了！苦恼！
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16楼2026-01-20 15:36:41
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发酵小牛马

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by hanwei1150 at 2015-11-23 15:16:34
摇瓶生长正常，培养基没问题，罐子培养参数也没问题，只是接种到罐子不生长，上罐成功后后保存的菌种后续就没有了这种问题，很什么原因？还有我想问大肠杆菌菌种活化的理论知识以及有效的方法，谢谢！...

同样的情况，种子接到罐上后快20个小时才长，下罐样品镜检有目的菌和杂菌，因为上罐初始条件是微压，会不会还是罐子密封性不好，染了菌，染得菌生长慢，抑制了目的菌的生长，后续生长过程中，出现了两者共存的现象，还有就是罐子微压是容易染菌么？
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17楼2026-01-26 11:33:48
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