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铜虫 (著名写手)

[求助] 荧光分光光度计使用的一些问题 已有3人参与

我扫的是硫化镉,按理来说应该有荧光吸收的,但是不太会操作,好像没扫出有用的图。
1.我去查了下分析化学书,书上有这么一段话是说拉曼光会对待测物荧光吸收有干扰,通过扫空白溶液找到合适的激发光波长。不太懂什么意思。
 http://\"荧光分光光度计使用的一些问题\"
 http://\"荧光分光光度计使用的一些问题-1\"
2.我扫的是发射图谱(激发波长固定),之前隔壁老师告诉我待测物的紫外最大吸收波长(待测物紫外最大吸收波长在233~235nm)不一定与它最合适的发射波长相符,有些物质没有紫外吸收但是有荧光吸收,按理说硫化镉是有光致发光特性的,应该扫得出来峰啊......
师哥告诉我设定的时候“发射终止波长”不要超过“激发波长”的2倍,还有“激发波长”应比“发射起始波长小”10~20nm,后一个无非是不想看到激发波长那个尖锐的峰我觉得这个无所谓,前一个我不知道这么设置有什么必要。
 http://\"荧光分光光度计使用的一些问题-2\"
3.这是激发波长为250nm时候得到的图谱,由于发射终止波长设定在480nm,所以只看到一个上升趋势,我觉得它应该是个峰吧。
 http://\"荧光分光光度计使用的一些问题-3\"
我也闹不清楚到底怎么才能正确的扫出来荧光吸收峰......求万能的虫友指点一二。
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01102

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你会正扫和反扫?正扫是扫最大发射,反扫是扫最大激发,激发发射对上就可以了,(怎么正扫反扫就别问我啦,打字来累)

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

6楼2015-11-23 21:57:01
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铜虫 (著名写手)

什么鬼,图片为什么裂了。。
2楼2015-11-23 11:13:46
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学术巨星

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不知道你用的什么仪器,要确定最佳激发和发射光谱,可以扫3D荧光光谱,有的仪器要求发射波长比激发波长大20nm,我用过瓦里安的荧光,它在设置3D荧光扫描时,没有激发和发射波长的设定限制,二者可以相等。得到3D光谱后,就可清晰看到最佳ex和em了。

发自小木虫IOS客户端
3楼2015-11-23 12:21:30
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铜虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 学术巨星 at 2015-11-23 12:21:30
不知道你用的什么仪器,要确定最佳激发和发射光谱,可以扫3D荧光光谱,有的仪器要求发射波长比激发波长大20nm,我用过瓦里安的荧光,它在设置3D荧光扫描时,没有激发和发射波长的设定限制,二者可以相等。得到3D光谱 ...

上海产的,F97PRO,说明书上得不到什么有用的信息。3D荧光光谱我不知道这台机器能不能扫,因为说明书里没包含你说的3D荧光光谱。老板不管,师哥(不是亲的)不会,实在不行不扫了。。。发论文少个表征也没什么。
4楼2015-11-23 21:48:33
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