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菌液测序结果全是非单克隆，求助分析 已有2人参与
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最近同时做了两个植物内生真菌基因库的TA克隆（简称M和N吧），用的18t载，蓝白斑筛选后，后送公司测序。 第一天M送了十几个样，除了部分公司说没有培养成功，无法提取质粒外，其他的基本都测序成功，且测出来的目的基因序列没有问题。 第二天N送了15个样，公司说5个培养失败，2个测序失败，7个非单克隆，1个测序成功，但是这个测序成功的序列我去载体后的基因序列压根不是我想要的。 然后我对7个非单克隆的序列尝试去载体，有几个序列能找到插入点前端序列，但是找不到插入点后端序列；还有的插入点前后端序列都找不到；还有的前后端序列都能找到，但插入的序列不是目的序列。 同一批的处理，出现这种结果，不是很理解，我在送样前每个都随机筛选了七八个样，跑了菌液pcr，看了条带，都没有问题。本人小白，也是刚刚接触克隆测序实验，还请大家多多指教。 以下为几张测序显示非单克隆的峰图：  截图00.jpg  截图01.jpg  截图02.jpg |
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