| 查看: 4863 | 回复: 7 | ||
[求助]
菌液测序结果全是非单克隆，求助分析 已有2人参与
|
|
最近同时做了两个植物内生真菌基因库的TA克隆（简称M和N吧），用的18t载，蓝白斑筛选后，后送公司测序。 第一天M送了十几个样，除了部分公司说没有培养成功，无法提取质粒外，其他的基本都测序成功，且测出来的目的基因序列没有问题。 第二天N送了15个样，公司说5个培养失败，2个测序失败，7个非单克隆，1个测序成功，但是这个测序成功的序列我去载体后的基因序列压根不是我想要的。 然后我对7个非单克隆的序列尝试去载体，有几个序列能找到插入点前端序列，但是找不到插入点后端序列；还有的插入点前后端序列都找不到；还有的前后端序列都能找到，但插入的序列不是目的序列。 同一批的处理，出现这种结果，不是很理解，我在送样前每个都随机筛选了七八个样，跑了菌液pcr，看了条带，都没有问题。本人小白，也是刚刚接触克隆测序实验，还请大家多多指教。 以下为几张测序显示非单克隆的峰图：  截图00.jpg  截图01.jpg  截图02.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有167人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 菌液测序常见的问题
已经有2人回复
2楼2015-11-22 20:31:24
3楼2015-11-22 21:52:08
4楼2015-11-23 09:14:26
5楼2015-11-23 09:34:35
6楼2015-11-23 22:45:37
7楼2016-03-07 09:21:18
8楼2017-05-05 10:34:54
