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919547443

金虫 (小有名气)

[求助] 液相色谱的梯度洗脱设置问题,柱子长短对出峰时间的影响 已有2人参与

之前我们老师做的橙皮苷的lc-ms,流动相A:0.1%甲酸   B:0.1%甲酸的甲醇,色谱柱是 Cosmosil 5C18-MS-II column    2.0×150 mm,流速是0.2ml。样品保留时间大概是20分钟左右。
洗脱是:0min      A 100%  B  0
              5min      A 100%  B  0
              25min    A 0          B  100%
              30min     A 100%    B  0
              35min     A  0   B 100%
现在我用的是 waters XTerra rp18 5μm 4.6×250mm column,其他条件相同,我样品保留时间要延长至36、37min左右(35min以后按最后的洗脱浓度进行),这样与后面的一些拖尾峰离得很近。想要问问怎么设置一下洗脱程序,可以使保留时间提前一些,节省时间。还想问问,柱子长的是不是要比柱子短的出峰慢?之间有没有换算关系?
加了甲酸是不是应该选择哪种质谱扫描模式?
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上海波粒

铜虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

连接质谱你搞这么大柱子啊,质谱一般是小直径,短柱子。看你的条件,前期可以适当增加B的比例
3楼2016-04-25 14:59:49
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paperyl

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
提高流速至0.6-0.8mL/min试试。
2楼2015-11-21 21:38:25
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