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919547443金虫 (小有名气)
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液相色谱的梯度洗脱设置问题,柱子长短对出峰时间的影响已有2人参与
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之前我们老师做的橙皮苷的lc-ms,流动相A:0.1%甲酸 B:0.1%甲酸的甲醇,色谱柱是 Cosmosil 5C18-MS-II column 2.0×150 mm,流速是0.2ml。样品保留时间大概是20分钟左右。 洗脱是:0min A 100% B 0 5min A 100% B 0 25min A 0 B 100% 30min A 100% B 0 35min A 0 B 100% 现在我用的是 waters XTerra rp18 5μm 4.6×250mm column,其他条件相同,我样品保留时间要延长至36、37min左右(35min以后按最后的洗脱浓度进行),这样与后面的一些拖尾峰离得很近。想要问问怎么设置一下洗脱程序,可以使保留时间提前一些,节省时间。还想问问,柱子长的是不是要比柱子短的出峰慢?之间有没有换算关系? 加了甲酸是不是应该选择哪种质谱扫描模式? |
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