| 查看: 2764 | 回复: 16 | |||
[交流]
色谱柱柱压冲柱时越来越高 已有12人参与
|
|||
|
我用的waters symmetrysheild RP18的色谱柱，流动相是含辛烷硫酸钠1g/t的0.05M磷酸二氢钾溶液和有机相，流速0.8 ml/min,先用40乙腈和60水0.8ml/min冲柱，再过度到100%甲醇，柱压越来越高，感觉柱子堵了，每次都柱压高到漏液，然后峰型彻底就不行了，峰型分叉，每次都这样，新柱子也毁了，大家能告诉我是什么原因吗 [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
回复此楼» 猜你喜欢
硝基苯如何除去
已经有3人回复
-
职称评审没过，求安慰
已经有37人回复
-
A期刊撤稿
已经有4人回复
-
垃圾破二本职称评审标准
已经有17人回复
-
回收溶剂求助
已经有6人回复
-
投稿Elsevier的Neoplasia杂志，到最后选publishing options时页面空白，不能完成投稿
已经有22人回复
-
申请26博士
已经有5人回复
-
EST投稿状态问题
已经有7人回复
-
毕业后当辅导员了，天天各种学生超烦
已经有4人回复
-
求助文献
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 液相色谱仪压力越来越高
已经有5人回复
- 【资源】8年色谱分离经验【转】
已经有50人回复
- 【资源】HPLC：色谱柱的使用与维护
已经有12人回复
- 【分享】柱色谱分离的操作和注意事项
已经有33人回复
2楼2015-11-21 15:51:41
赈早见琥珀主
木虫 (正式写手)
- 应助: 228 (大学生)
- 金币: 3726.3
- 红花: 20
- 帖子: 589
- 在线: 365.7小时
- 虫号: 1762852
- 注册: 2012-04-18
- 性别: GG
- 专业: 药物分析
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
先说柱压，从你说的情况来看应该是盐堵了，60%的水并不算合适，带盐流动相冲洗的时候肯定要用90%左右的水去冲洗才能将残留的盐完全冲洗干净；其次峰型分叉，因为你现在里面还是堵的，所以不好说柱子有没有彻底坏掉，但是有一点，离子对试剂本身会对色谱柱造成不可逆的伤害，且会缩短色谱柱的使用寿命，用的时间久了柱效自然会降低到不可接受的程度。 目前还是建议你好好冲洗色谱柱，具体方法是90%的水，0.2~0.3ml/min流速过夜冲洗，等这个压力正常了再缓缓切换到甲醇进行冲洗。如果过夜冲并不能使压力恢复正常，柱压还高，找会拆柱子的，把柱筛板拆下来超声清洗（慎用这一步，对色谱柱伤害比较大） |
10楼2015-11-22 22:50:01
3楼2015-11-21 22:43:42
静谧limi
铜虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1247.4
- 散金: 50
- 红花: 4
- 帖子: 227
- 在线: 108.6小时
- 虫号: 2431352
- 注册: 2013-04-22
- 专业: 生物信息学
4楼2015-11-21 23:19:41
5楼2015-11-22 15:53:41
6楼2015-11-22 15:55:52
zldchy
铜虫 (正式写手)
- 应助: 14 (小学生)
- 金币: 1731.3
- 散金: 3
- 红花: 2
- 帖子: 355
- 在线: 55.4小时
- 虫号: 3419412
- 注册: 2014-09-16
- 性别: GG
- 专业: 质谱分析
7楼2015-11-22 16:43:22
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
1你用的什么液相，安捷伦1260系列含盐流动相必须在下面的管路，沃特斯一般没有要求，你看的梯度混合的位置。 2你的有机相用的是什么，磷酸盐非常容易结晶和生长微生物，我们一般先用10%有机相冲洗半小时，稀释柱子和机器内的盐，然后用100%的有机相保存柱子，而且一个柱子只用一种或类似的流动相 3我们不用乙腈和甲醇混合冲洗柱子，这个是老师定的，我也不知道 发自小木虫Android客户端 |
8楼2015-11-22 17:23:34
9楼2015-11-22 17:25:32