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临江弦

新虫 (初入文坛)

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[交流] 色谱柱柱压冲柱时越来越高已有12人参与

我用的waters symmetrysheild RP18的色谱柱，流动相是含辛烷硫酸钠1g/t的0.05M磷酸二氢钾溶液和有机相，流速0.8 ml/min,先用40乙腈和60水0.8ml/min冲柱，再过度到100%甲醇，柱压越来越高，感觉柱子堵了，每次都柱压高到漏液，然后峰型彻底就不行了，峰型分叉，每次都这样，新柱子也毁了，大家能告诉我是什么原因吗

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

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过程是扎实的，结果是必然的．

1楼 2015-11-20 22:54:38

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

赈早见琥珀主

木虫 (正式写手)

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先说柱压，从你说的情况来看应该是盐堵了，60%的水并不算合适，带盐流动相冲洗的时候肯定要用90%左右的水去冲洗才能将残留的盐完全冲洗干净；其次峰型分叉，因为你现在里面还是堵的，所以不好说柱子有没有彻底坏掉，但是有一点，离子对试剂本身会对色谱柱造成不可逆的伤害，且会缩短色谱柱的使用寿命，用的时间久了柱效自然会降低到不可接受的程度。
目前还是建议你好好冲洗色谱柱，具体方法是90%的水，0.2~0.3ml/min流速过夜冲洗，等这个压力正常了再缓缓切换到甲醇进行冲洗。如果过夜冲并不能使压力恢复正常，柱压还高，找会拆柱子的，把柱筛板拆下来超声清洗（慎用这一步，对色谱柱伤害比较大）