| 查看: 308 | 回复: 0 | ||
divingfish新虫 (小有名气)
|
[求助]
重组突变caspase遇问题求解答
|
|
各位大神好，本人小硕，目前打算自己clone wild-type和mutant caspase-2 into an expression plasmid containing the small fluorophore. 同样的试验步骤成功了wild-type但是mutant一直不成功。细菌纯化后的产物经过cleavage后跑agarose gel电泳的结果中一直有vector中的tBid条带，而成功的wt没有这条带，只有caspase的条带。 大致试验流程如下： PCR复制 inserted DNA --> PCR产物以及vector cleavage --> Ligation --> transfected bacteria --> 纯化产物再切开验证 做了几次重复实验，也尝试改变过实验部分条件，也用过agarose电泳纯化，都没有inserted DNA的踪影。求问大家觉得问题可能出现在什么地方？谢谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
解密度鲁特韦——新一代HIV整合酶抑制剂的化学、药理与产业化图景
已经有0人回复
-
左炔诺孕酮从沃氏氧化物到炔基化反应的工艺迭代与靶点解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有55人回复
-
“关闭瘙痒信号”的多肽地非法林醋酸盐全解析
已经有1人回复
-
Tosylate-DPA-714介导¹⁸F-DPA-714 PET成像的前沿进展
已经有0人回复
-
I-BRD9: BRD9溴结构域化学探针，BET选择性>700倍
已经有0人回复
-
莫那利珠单抗阻断NKG2A/HLA-E抑制通路 | Biochempartner
已经有0人回复
-
GSPT1口服分子胶降解剂MRT-2359 | Biochempartner
已经有0人回复
-
碳青霉烯类抗生素为何需联用西司他丁钠？ | Biochempartner
已经有0人回复
-
源自蕨类植物的抗炎美白活性分子去甲氧基荚果蕨素 | Biochempartner
已经有0人回复
-
肠道里的"代谢开关"：Fexaramine用肠道限制性重新定义 FXR 激动剂
已经有0人回复
