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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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断剑祭红颜

新虫 (初入文坛)


[交流] 求助各位大神帮我分析一下为啥表达的产物始终没有酶活。。没有金币求助帖都发不起

本人刚进实验室,拿到了4株实验室前人构建的工程菌,都是BL21的。
然后按照之前人留下的实验方法做,得到的粗酶液始终没有酶活。4株菌4种酶,都没有酶活。
考虑过可能是产生了大量包涵体,降低了温度和IPTG浓度到15℃和0.05mm,得到的产物依然没有酶活。
考虑过可能是超声波破碎的问题,各种功率各种时间破碎,还是没有酶活。上清液和破碎的沉淀都没有酶活。
也想过可能是质粒丢失,但是这4株都是新构建的菌,不肯能全部都丢失吧。而且发酵液中反而有微弱的酶活。
限于水平问题,我只能想到这些原因了,恳请小木虫的大神们帮忙分析一下为什么始终没有酶活啊。
我已经在这卡住好几星期了。。
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LH小黎

银虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主现在解决了吗,我也遇到同样的问题

发自小木虫Android客户端
2楼2016-10-26 17:44:45
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梦想天行

木虫 (职业作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
前人?那就原因多了

发自小木虫Android客户端
3楼2016-10-26 18:47:37
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