应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 求助各位大神帮我分析一下为啥表达的产物始终没有酶活。。没有金币求助帖都发不起
31/1返回列表
查看: 857  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

断剑祭红颜

新虫 (初入文坛)

[交流] 求助各位大神帮我分析一下为啥表达的产物始终没有酶活。。没有金币求助帖都发不起

本人刚进实验室，拿到了4株实验室前人构建的工程菌,都是BL21的。
然后按照之前人留下的实验方法做，得到的粗酶液始终没有酶活。4株菌4种酶，都没有酶活。
考虑过可能是产生了大量包涵体，降低了温度和IPTG浓度到15℃和0.05mm，得到的产物依然没有酶活。
考虑过可能是超声波破碎的问题，各种功率各种时间破碎，还是没有酶活。上清液和破碎的沉淀都没有酶活。
也想过可能是质粒丢失，但是这4株都是新构建的菌，不肯能全部都丢失吧。而且发酵液中反而有微弱的酶活。
限于水平问题，我只能想到这些原因了，恳请小木虫的大神们帮忙分析一下为什么始终没有酶活啊。
我已经在这卡住好几星期了。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2015-11-20 22:34:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LH小黎

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主现在解决了吗，我也遇到同样的问题

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2016-10-26 17:44:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦想天行

木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
前人？那就原因多了

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-10-26 18:47:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 断剑祭红颜 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭