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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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shoes

铜虫 (初入文坛)

[交流] 求助:PCR产物电泳时条带为什么被“劈开”了?

向各位老师请教:PCR产物跑琼脂糖凝胶电泳的结果如图一。电泳条件:100mV,30min
最右端为marker,大小分别是100,200,…600kb
预期的PCR产物条带大小是480kb,不知道为什么出现了两条很接近的条带,个人感觉不像是引物二聚体。
奇怪的是酶切以后再电泳这种现象又消失了,条带清晰而完整。如图二
请各位老师帮忙分析分析原因,谢谢!
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libo0628

银虫 (小有名气)

非特异扩增,退火温度提高两度试试
5楼2008-09-17 21:51:32
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christopher

金虫 (小有名气)

原因可能是制胶过程中出现问题,或是由于凝胶混合不均,或是配制过程导致底部和上层浓度不一致,所以电泳速度就不一样
同甘共苦,肝胆相照
2楼2008-09-16 01:18:51
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shoes

铜虫 (初入文坛)

非常感谢christopher站友的意见!
不过PCR产物和酶切产物电泳用的是同一批胶,为什么后者没有发现这种现象呢?
另外我个人猜想这种情况下(表层和底层之间出现了密度梯度)条带是不是应该拉的比较长,而不是分为两条?
3楼2008-09-16 10:42:24
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shoes

铜虫 (初入文坛)

有个师姐说可能是部分扩增产物自身成环了,具体怎么回事还不大清楚,比如形成机制,能不能避免等等,准备再问问她。
有哪位战友能解释一下吗?非常感谢!
4楼2008-09-17 20:16:10
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