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HollyHoliday

新虫 (初入文坛)

[求助] 样品为石油醚部位分出来的一段,请问这种情况怎么分? 已有1人参与

石油醚部位
1.先用正相硅胶,石油醚-乙酸乙酯洗脱,分了8段,然后取了第6段来继续分,这一段的极性大概是石油醚:乙酸乙酯=8:1~1.5:1
2.继续分还是用正相硅胶,摸条件后用的是石油醚:丙酮体系来跑,又分了三段,取的是第一段继续分,这一段的极性大概是100:1洗脱下了的
3.然后现在这个部分甲醇溶不了,要加少许二氯甲烷才可以溶,所以上不了纯甲醇体系的LH-20,于是便只将其用甲醇溶,甲醇不溶的部分取出,发现此部分为白色,点板时硫酸涂的时候是呈白色,烧完后呈紫色的点,初步推测是β-谷甾醇。但是取出白色不溶物后,打算把剩余甲醇可溶的部位旋干上凝胶,发现再用甲醇溶解时,又有白色物质不溶,是不是还是β谷甾醇?
实在不知道怎么处理,是要继续将白色物质分离,将剩下的物质上凝胶,还是直接再过一次正相呢?
谢谢各位植化经验好的师兄师姐们,给我点建议,本人研一刚接触植化,还有很多不太懂的地方,希望大家一起交流交流!
初上小木虫,奖金有点少,望见谅!

样品为石油醚部位分出来的一段,请问这种情况怎么分?
分开之后的板子,左(白色物质)右(甲醇可溶部分)-(二氯:丙酮=50:1)


样品为石油醚部位分出来的一段,请问这种情况怎么分?-1
未分离白色物质之前的板子(二氯:丙酮=50:1)
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大爱生活

木虫 (正式写手)

石油醚部位本身极性比较小,分离难度稍高。你这个看着分离度还是挺好的,建议还是先正相柱过一下,砍断,梯度不要变化太快。不知道你是用什么方法拿掉白色物质的,应该是没有去除干净。按照你的描述,我也觉得应该是甾醇类。另外,LH-20不是只能用纯甲醇系统的,我们一般用甲醇:氯仿或者二氯甲烷=1:1较多。

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乐而学而乐
3楼2015-11-17 17:52:09
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fjm890212

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先绝对是甾体,β-谷甾醇很好结晶的,再说石油醚部分,多的是甾体,或者萜类。我当时分出的也是这种颜色的一个点,但里面有三种物质,什么计曼尼醇,香树脂醇等等。所以其实这小极性里面一般没什么好东西的!可以在氯仿,二乙部位好好花时间!个人愚见,仅供参考!
5楼2015-11-18 16:49:04
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HollyHoliday

新虫 (初入文坛)

铅笔画圈的地方是有254紫外的
2楼2015-11-17 17:39:38
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HollyHoliday

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 大爱生活 at 2015-11-17 17:52:09
石油醚部位本身极性比较小,分离难度稍高。你这个看着分离度还是挺好的,建议还是先正相柱过一下,砍断,梯度不要变化太快。不知道你是用什么方法拿掉白色物质的,应该是没有去除干净。按照你的描述,我也觉得应该是 ...

嗯嗯,是的,没有分离干净,刚刚有朋友帮我用正相把白色物质单独处理出来了,已经有纯的了,只是剩余甲醇可以溶的部分,应该还是存在以下那个白色物质,毕竟甲醇还是可以溶一些,我在想是用凝胶过还是用正相,因为上面有三个点隔着很近,有两个有紫外,一个没紫外,估计分子量会有差异,所以想用凝胶。
氯甲体系过凝胶柱我也有想过,但是师姐说氯甲体系过柱子效果不是很好,不建议用,所以就在想要不要用正相,可是正相的话不知道用什么体系,试过石油醚乙酸乙酯和石油醚丙酮跑板,都没跑开,只有二氯和丙酮效果最好,可是因为极性太大,没发把点压下来上柱,所以还无从下手
4楼2015-11-17 21:17:23
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HollyHoliday

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by fjm890212 at 2015-11-18 16:49:04
首先绝对是甾体,β-谷甾醇很好结晶的,再说石油醚部分,多的是甾体,或者萜类。我当时分出的也是这种颜色的一个点,但里面有三种物质,什么计曼尼醇,香树脂醇等等。所以其实这小极性里面一般没什么好东西的!可以 ...

嗯嗯,谢谢你!是的是的,师姐也说确实没什么好东西,其实老板也没抱希望能在里面分出什么,所以说让我练练手,因为是新手。只是第一次接触这些,所以想以一个好的态度,多问多查资料去熟悉这一块吧,尽量分,能分多少是多少
如果能有什么好的建议推荐,非常感谢您~
现在去除谷甾醇后还有大概100mg左右,打算用一小部分过个氯甲一比一的凝胶柱,看有没有分离效果,如果效果不行的话,就想再找个好点的体系看再过一个正相柱吧,看您有没有更好的方法。
6楼2015-11-18 19:48:19
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fjm890212

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
HollyHoliday: 金币+5, ★★★很有帮助, 还是有给一些思路让我选择,所以非常感谢 2015-11-19 17:12:51
引用回帖:
6楼: Originally posted by HollyHoliday at 2015-11-18 19:48:19
嗯嗯,谢谢你!是的是的,师姐也说确实没什么好东西,其实老板也没抱希望能在里面分出什么,所以说让我练练手,因为是新手。只是第一次接触这些,所以想以一个好的态度,多问多查资料去熟悉这一块吧,尽量分,能分 ...

没必要额,石油醚-丙酮反复洗脱,硅胶柱子就好我感觉你那里面有蜡,所以开始有白色点,反复重结晶,如果真是谷甾醇,会慢慢结晶出来的。

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7楼2015-11-18 23:22:44
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yangchaotom

金虫 (著名写手)

挂板子。包治百病的方法。
8楼2015-11-20 16:47:38
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yangchaotom

金虫 (著名写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by yangchaotom at 2015-11-20 16:47:38
挂板子。包治百病的方法。

刮板子。
9楼2015-11-20 16:47:56
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ruiruilili

铁虫 (初入文坛)

我做过,跟你的一模一样。很难处理。也可能活性不会太高。只是也许。估计是甾醇。

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加油!
10楼2015-11-21 07:25:28
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