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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 关于高效制备液相色谱
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海洋之斌_520

铁虫 (小有名气)

[求助] 关于高效制备液相色谱 已有3人参与

如果样品加入色谱甲醇溶解性不好，可以用已腈来溶解吗？因为只做过甲醇的，压力那些都不知道的。不知道具体该怎么操作。还有，样品不显紫外，荧光。但碘显可以看到明显的点，香草醛显色也可以看到明显的点，可以用不？还有低于50%的EA/PE可以用不？我听师兄说小极性的东西最好不要用液相。
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好好做实验
1楼 2015-11-14 12:14:27
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

海洋之斌_520

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 476054377 at 2015-11-16 10:45:59
看来你方法很独特。我们的实验都是一个总的浸膏跑个全波长的，从10%-80%的甲醇跑一个梯度，之后砍断了再同样的条件跑，完了再将条件的范围缩小。就估计到我需要的样品在哪个极性，用那个极性的甲醇溶解样品再做制备 ...

我做海洋真菌的，分到一个算一个

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好好做实验
11楼2015-11-16 23:02:39
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Jngxq

木虫 (著名写手)
请问楼主的制备色谱什么牌子的，价格多少？
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2楼2015-11-14 18:09:57
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风起峰落

新虫 (小有名气)
你用的是什么型号的柱子？流动相是什么成分和比例？

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3楼2015-11-14 20:31:20
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海洋之斌_520

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Jngxq at 2015-11-14 18:09:57
请问楼主的制备色谱什么牌子的，价格多少？

岛津LC-20A，价格还算便宜，据说四五十万

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好好做实验
4楼2015-11-15 00:22:38
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海洋之斌_520

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 风起峰落 at 2015-11-14 20:31:20
你用的是什么型号的柱子？流动相是什么成分和比例？

C18柱，那个实验还没开始做。因为是团队的东西。所以条件要先摸好了再做。再说了，这也是自己第一次真正的用液相，用的好的话就更有信心了

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好好做实验
5楼2015-11-15 00:27:23
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Jngxq

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 海洋之斌_520 at 2015-11-15 00:22:38
岛津LC-20A，价格还算便宜，据说四五十万
...

你这不会是g级的吧？安捷伦的mg级的才20w
多，国产的8－10w

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6楼2015-11-15 01:00:33
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海洋之斌_520

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by Jngxq at 2015-11-15 01:00:33
你这不会是g级的吧？安捷伦的mg级的才20w
多，国产的8－10w
...

不知道啊，液相懂的七七八八，不怎么会用，对这些也不了解。要自己慢慢摸索呢

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好好做实验
7楼2015-11-15 01:06:43
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476054377

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
海洋之斌_520: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-11-19 00:13:01
可以用乙腈做制备的，我用是制备也是岛津的，不过我的是LC-6AD。但是不知道你所谓的溶解性好不好是有多不好。你液相跑出来的条件，用那个调节溶解，当然我不知道你的定量环是多少毫升的，我的是2.5ml的，有时候我的样品溶解为8ML，就进样多几针。样品最好用洗脱剂来溶解，不行就加热溶解，放冷，不析东西出来就可以制备了。如果不用洗脱剂溶解，到时候容易堵柱子，冲柱就惨了
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8楼2015-11-15 20:40:32
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海洋之斌_520

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 476054377 at 2015-11-15 20:40:32
可以用乙腈做制备的，我用是制备也是岛津的，不过我的是LC-6AD。但是不知道你所谓的溶解性好不好是有多不好。你液相跑出来的条件，用那个调节溶解，当然我不知道你的定量环是多少毫升的，我的是2.5ml的，有时候我的 ...

我们一般做液相直接在制备液相那里摸条件，10微升的试，从纯甲醇开始，然后慢慢减少甲醇的量，直至峰型好，再来慢慢加大进样量

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好好做实验
9楼2015-11-15 22:08:52
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476054377

金虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 海洋之斌_520 at 2015-11-15 22:08:52
我们一般做液相直接在制备液相那里摸条件，10微升的试，从纯甲醇开始，然后慢慢减少甲醇的量，直至峰型好，再来慢慢加大进样量
...

看来你方法很独特。我们的实验都是一个总的浸膏跑个全波长的，从10%-80%的甲醇跑一个梯度，之后砍断了再同样的条件跑，完了再将条件的范围缩小。就估计到我需要的样品在哪个极性，用那个极性的甲醇溶解样品再做制备。不够一般都是30%或40%做制备的，很少会用极性比这2个小的洗脱剂
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10楼2015-11-16 10:45:59
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