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肉肉肉.

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by mzhyan at 2015-11-14 21:06:42
blessing

thanks

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11楼2015-11-16 12:17:36
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zf
12楼2015-11-16 12:22:46
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zhangyang16

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
肉肉肉.: 金币+5 2015-11-17 11:19:23
引用回帖:
10楼: Originally posted by 肉肉肉. at 2015-11-16 12:15:27
在ncbi里面我选的cds区域,就是编码区。根据这个克隆然后表达。用的9K质粒。但是转化到酵母gs115里面之后提取酵母组基因,照理说用AOX1通用引物应该有两条条带,但是只有一条。难道gs115里面的AOX1基因组坏了?还有 ...

发酵液臭应该是正常的,我也是将我的目的基因连接在9K载体上,然后转到GS115中,发酵液也很臭。最好不要加抗生素,不知道你表达的是什么。我表达的是酶,之前我的师兄加了抗生素,后来做抑菌实验的时候发现有活性,但是估计都是抗生素的抑菌效果,也曾经试过,透析处理抗生素透不掉。
13楼2015-11-17 10:51:10
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肉肉肉.

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by zhangyang16 at 2015-11-17 10:51:10
发酵液臭应该是正常的,我也是将我的目的基因连接在9K载体上,然后转到GS115中,发酵液也很臭。最好不要加抗生素,不知道你表达的是什么。我表达的是酶,之前我的师兄加了抗生素,后来做抑菌实验的时候发现有活性, ...

谢谢回复!请问你表达出来了吗?我表达的是一个简单的小蛋白而已,450bp左右,不知道为啥这么难,你也是用的bmmy吗?还有你做了pcr鉴定吗?

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14楼2015-11-17 11:26:25
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wyfdgg

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by 肉肉肉. at 2015-11-16 12:15:27
在ncbi里面我选的cds区域,就是编码区。根据这个克隆然后表达。用的9K质粒。但是转化到酵母gs115里面之后提取酵母组基因,照理说用AOX1通用引物应该有两条条带,但是只有一条。难道gs115里面的AOX1基因组坏了?还有 ...

发酵液变臭的话,应该就是染菌了。你可以结合镜检看一下。能留一下你的联系方式吗,我最近也在做,和你遇到的问题差不多。
15楼2015-11-17 13:52:10
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