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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 微米和纳米 » 合成表征 » 最近在做微球偶联抗体的实验，请问偶联上抗体的微球如何和过量的游离抗体分离
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sagaphilip

新虫 (初入文坛)

[求助] 最近在做微球偶联抗体的实验，请问偶联上抗体的微球如何和过量的游离抗体分离 已有1人参与

微球用的是粒径100nm的荧光标记聚苯乙烯小球，这个微球用离心法和溶剂分离的效果很差，14000转20分钟后上清还是有很多荧光。
我担心：第一，偶联上抗体的微球收率太差。第二，离心速度过高导致微球聚集。第三，沉淀中还有少量的游离抗体影响后续检测结果。
请问大家有什么建议和好的办法，我自己琢磨用超滤离心能不能分的比较彻底。
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1楼 2015-11-13 09:12:53
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sagaphilip

新虫 (初入文坛)
自顶一下
2楼2015-11-16 10:14:16
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一盏离愁.xx

金虫 (小有名气)
你这个离心力不算太大，但是100nm的微球不太容易离心下来，这个你要看你买微球的厂家给你的离心建议，这个方案整体还是可行的

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3楼2015-11-22 13:58:48
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幸运星图

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

说的有道理，微球的粒径比较小，说明相同的离心速度以及时间，离心出的微球量不是很彻底，上清液中会有漂浮的荧光微球颗粒，可是适当的提高速度以及时间，就如楼上所言，可以联系厂家对于不同粒径的微球离心时间以及速度的要求，
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4楼2017-03-15 15:46:48
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养花的水瓶

新虫 (初入文坛)
亲，你的问题解决了吗？
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5楼2018-02-03 17:28:39
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yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)
看看普睿迈格公司200nm的羧基磁性微球，用磁分离，洗涤很方便

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6楼2018-02-04 13:25:43
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youjihuaxue2000

银虫 (小有名气)
100 nm聚苯乙烯荧光微球偶联蛋白后，应该使用离心法分离纯化，而且很容易操作，离心后超声就能分散。超声之后还容易聚集，不是离心的问题，而是粒子偶联蛋白后表面的电荷改变了，粒子之间的静电斥力下降或消失所致。超滤离心可以的，但有点杀鸡牛刀的意思，做做科研发发文章可以，做产业就呵呵了16708697
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7楼2021-08-08 15:14:32
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youjihuaxue2000

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 幸运星图 at 2017-03-15 15:46:48
说的有道理，微球的粒径比较小，说明相同的离心速度以及时间，离心出的微球量不是很彻底，上清液中会有漂浮的荧光微球颗粒，可是适当的提高速度以及时间，就如楼上所言，可以联系厂家对于不同粒径的微球离心时间以及 ...

我以前在外企卖这类产品，你太高估了Thermo的销售和技术支持水平了
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8楼2021-08-08 15:17:07
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