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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 免疫实验 » 关于免疫沉淀和免疫共沉淀的基础问题
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abczhuazhua

铜虫 (初入文坛)

[交流] 关于免疫沉淀和免疫共沉淀的基础问题 已有3人参与

老师们好，我准备做IP和CoIP的试验，目前正在看文献阶段，有个简单的问题，希望不吝赐教。
CoIP：anti-A能够将互作的A和B一起拉下来，在接下来的blot检测中，用anti-A就可以将A和B分别检测出来吗？还是说再做blot的时候用anti-A只能检测到A，anti-B只能检测到B？
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1楼 2015-11-12 17:21:31
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小普果果

新虫 (初入文坛)
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不是分别检测的，你拉下来的蛋白经过变性胶以后两个蛋白就分开了，然后A抗体针对A蛋白，B抗体针对B蛋白
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2楼2016-01-21 14:53:28
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abczhuazhua

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小普果果 at 2016-01-21 14:53:28
不是分别检测的，你拉下来的蛋白经过变性胶以后两个蛋白就分开了，然后A抗体针对A蛋白，B抗体针对B蛋白

谢谢你哟。
还有，input是什么意思？whole-cell lysates全细胞溶解产物？以及空白对照为什么要用anti-GST？
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3楼2016-03-01 12:58:04
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萝卜涨价了

铜虫 (初入文坛)
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3楼: Originally posted by abczhuazhua at 2016-03-01 12:58:04
谢谢你哟。
还有，input是什么意思？whole-cell lysates全细胞溶解产物？以及空白对照为什么要用anti-GST？...

你好，你这个没有上下文不太好说，whole-cell lysates应该就是总蛋白，里面可能含有会与A发生相互作用的蛋白B。置于空白试验为什么要用anti-GST，没有上下文不好判断，猜测可能是去除非特异性吸附？恩。。这里有一篇比较基础的关于CO-IP原理实验的讲解，希望对你有帮助。（www.detaibio.com/topics/co-ip-overview.html）
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4楼2018-04-25 09:14:12
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reachwenjing

新虫 (初入文坛)
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4楼: Originally posted by 萝卜涨价了 at 2018-04-25 09:14:12
你好，你这个没有上下文不太好说，whole-cell lysates应该就是总蛋白，里面可能含有会与A发生相互作用的蛋白B。置于空白试验为什么要用anti-GST，没有上下文不好判断，猜测可能是去除非特异性吸附？恩。。这里有一 ...

你好，我也有些coip上的实验问题想学习一下，您方便吗？

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5楼2018-06-22 07:49:53
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