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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » WB条带有气泡是什么原因引起的？如何避免？
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雨停了20

新虫 (初入文坛)

[求助] WB条带有气泡是什么原因引起的？如何避免？ 已有6人参与

最近做的WB图片，曝光条带有气泡，请问是什么原因引起的啊？该如何避免呢？

WB条带有气泡是什么原因引起的？如何避免？
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1楼 2015-11-11 16:10:36
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雨停了20

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 啦啦啦大胖子 at 2015-11-11 20:31:02
转膜，封闭，抗体孵育过程中都可能产生气泡，在这个过程中一定要避免气泡的产生。
1.转膜的时候可以用一次性涂布棒之类的东西赶走气泡；
2.封闭，抗体孵育的时候，如果是液体很多的话，基本不会有气泡产生，如果液 ...

封闭是用50mL脱脂牛奶在摇床进行的，封闭这一步应该没有问题。转膜的时候也有用塑料刮刮了几下，孵育抗体的时候是用杂交袋进行的。可能最容易出现问题的就是转膜和抗体孵育这两步了吧
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11楼2015-11-12 16:56:34
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唯不忘相思

金虫 (小有名气)

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★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-11-11 22:58:30
转膜的时候在胶和膜接触的面有气泡。在转膜的时候可以先加转膜缓冲液将膜润湿，胶和膜放好后可以用玻璃棒轻轻擀几下，就可以减少胶和膜之间的气泡。特别是在你需要的蛋白条带附近一定要细心检查。
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2楼2015-11-11 19:52:00
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冰城＇若雪

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-11-11 22:59:17
转膜时出现的，在转膜液中可以加入一定量的甲醇，盖上上面那层滤纸后，可用玻璃棒来回滚动

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3楼2015-11-11 20:20:58
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啦啦啦大胖子

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-11-11 22:58:49
转膜，封闭，抗体孵育过程中都可能产生气泡，在这个过程中一定要避免气泡的产生。
1.转膜的时候可以用一次性涂布棒之类的东西赶走气泡；
2.封闭，抗体孵育的时候，如果是液体很多的话，基本不会有气泡产生，如果液体很少，可以用枪吸走气泡。
PS:一般我们都是用测序带之类的东西加液体进去后，用封口的东西封到膜的大小左右，再加膜，有气泡的话，就用枪吸走气泡，封最后的口，保证液体与膜尽可能接触。
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4楼2015-11-11 20:31:02
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