24小时热门版块排行榜    

查看: 760  |  回复: 2

silulu23

新虫 (小有名气)

[交流] 定点突变相关问题

最近要开始做定点突变了,我的DNA加质粒有14kb,想突变一个氨基酸,需要突变掉两个碱基,挑了好多试剂盒,还是不太清楚,Agilent的貌似口碑不错,看了看他们的说明书,多位点的好像至多能用8KB的模板,XL款的大于8Kb的好像又只能是单个定点突变,不知道有没有哪位师兄师姐有这方面的经验可以传授一下?感激不尽~~
回复此楼
Everyday is a new day!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silulu23

新虫 (小有名气)

有做突变的师兄师姐们吗,请不吝赐教,感激~~~

发自小木虫Android客户端
Everyday is a new day!
2楼2015-11-05 10:25:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大脸猫ld

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
之前也做过一个13kb质粒的定点突变,突两个位点的,实验室不给专门买试剂盒,所以就自己倒载体。
前提是序列是已知的,寻找包含突变位点的双切片段,注意两边只能是单酶切位点。
把要突变的DNA片段部分剪切下来,然后连接到比较小的载体上,让突变载体小于7KB,突变后测序成功了再倒回原来的载体上。
3楼2015-12-24 09:49:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 silulu23 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 什么时候开奖? +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +5 炎黄贵胄 2026-08-22 6/300 2026-08-24 06:34 by sincosx
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +16 羊腰板 2026-08-21 17/850 2026-08-23 23:02 by tianxiaochun
[基金申请] 让我中一个面上吧! +12 大萍1987 2026-08-20 15/750 2026-08-23 20:44 by 大萍1987
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
信息提示
请填处理意见