应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » petDuet1插入两个基因，同时加四个酶没切载体有人做过吗？
71/1返回列表
查看: 1302  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

laraine40

金虫 (小有名气)

[交流] petDuet1插入两个基因，同时加四个酶没切载体有人做过吗？ 已有6人参与

如题，我准备做一个两个蛋白的共表达，在pETDuet1的两个不同的多克隆位点里，用两组酶分别双酶切，分别是是Nco1和Sal1，Nde和Xho1。
想问问大侠们酶切一次可以完成吗？四个酶会不会把它切断了？或者有没有什么好点的建议？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-11-02 10:30:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kangaroo0513

新虫 (正式写手)
我去。。。服了。。。
回复此楼
2楼2015-11-02 10:54:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosci

捐助贵宾 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
载体切成4段了，神仙也连不上了

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2015-11-02 13:15:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangyao7255

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
应该不行吧，质粒最后一切出来的部分只能各连目的基因的一侧，目的基因的另一侧又不是粘性末端
而且按照你的思路，做出来的蛋白也不是共表达啊。如果前面的有终止密码，后面的就不会表达。如果前面的没有终止密码，和后面的会形成一个连到一体的蛋白，你确定还会有生物活性？
赞一下 回复此楼
4楼2015-11-02 14:58:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

江湖人送绰号

金虫 (小有名气)
风险较大
回复此楼
我巨逗而你不知
5楼2015-11-02 17:18:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘零星lin

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
试下就知道答案了。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2015-11-02 18:39:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

admission

木虫 (著名写手)
分开做比较好

发自小木虫Android客户端
回复此楼
7楼2015-11-02 19:07:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 laraine40 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭