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jeff瓜瓜

铁虫 (小有名气)

[求助] western blot后的丽春红染色 ponceau S染的是什么？ 已有3人参与

western blot后的丽春红染色 ponceau S染的是什么？目前我只知道是某个内参基因表达的蛋白，这个基因比较稳定，表达的蛋白量差异不大。我想知道的是这个基因究竟是一个什么基因，为什么他所表达的蛋白就能作为参照，并且不随外界条件变化而发生明显的差异？谢谢
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1楼 2015-11-02 08:54:00
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
ponceau S染色和内参没关系
你可以把他看作是考马斯蓝染色总蛋白。
blot如果用考马斯蓝染色效果不好，而且不可逆。
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
3楼2015-11-03 02:22:11
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liweiwaxmc

铜虫 (小有名气)
你说的这个应该是一个看家基因表达的蛋白吧？
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2楼2015-11-02 21:57:34
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shengliding

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
Ponceau S染色是检测转到摸上的蛋白，简单判断转膜效率和蛋白的状态，染色可逆，TBS或TBST可以洗掉，不影响后续检测过程。内参蛋白跟这个没啥关系，内参蛋白是在你抗体检测后和你的目标蛋白比较，可认为内参蛋白持续稳定表达，不受环境显著影响，因此对比出你的目标蛋白在某种环境条件下量的相对变化。
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4楼2015-11-04 10:22:28
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陈爱中

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
染的是你转印到膜上面的蛋白，一方面是检测你转膜是不是成功，比如有气泡什么染色也可以看得到。另一方面你做植物的，膜上有明显一条比较粗的条带，那个条带是可以拍下来做loading图片的。

内参不是不随环境改变，而是在你实验中不受你实验条件的影响，一般常用的有GAPDH和tubulin。
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5楼2015-11-04 12:42:30
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