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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 关于pcr扩增目的片段的问题
汕头大学海洋科学接受调剂
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ccat1994

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于pcr扩增目的片段的问题 已有3人参与

我是新手，对于pcr扩增目的片段有个小小的问题。就是，我需要扩增A基因，这个A基因位于某菌株染色体DNA上，因此，我在进行扩增的时候会以某菌株染色体DNA为模板,并添加A基因上下游引物进行扩增，那么我将会得到扩增出来的A基因片段。问题是：在进行pcr扩增的时候不是会把整个dna的长度扩增出来嘛？为什么最终会只得到了目的基因的片段呢？

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1楼 2015-10-31 12:15:02
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梦弋惊龙

铁杆木虫 (著名写手)

***

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 鼓励发帖积极交流。 2015-11-01 18:09:55
ccat1994: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-11-04 13:16:56
扩增时只会克隆起始引物和终止引物之间的序列，如果没有起始引物，就无法开始扩增，你起始引物在哪里，就从哪里开始复制，终止引物在哪里就在哪里结束，因此不会复制整个片段

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******
2楼2015-10-31 12:47:26
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ccat1994

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 梦弋惊龙 at 2015-10-31 12:47:26
扩增时只会克隆起始引物和终止引物之间的序列，如果没有起始引物，就无法开始扩增，你起始引物在哪里，就从哪里开始复制，终止引物在哪里就在哪里结束，因此不会复制整个片段
...

终止引物是什么？

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3楼2015-10-31 13:23:13
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潇湘、西瓜匠

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，非常感谢。 2015-11-01 18:10:01
ccat1994: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-11-04 13:17:07
不会的，第一轮复制可能会比你要的长，但是下一轮开始，就算是目的条带了

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木有西瓜的冬天~~~
4楼2015-10-31 13:29:34
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ccat1994

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 潇湘、西瓜匠 at 2015-10-31 13:29:34
不会的，第一轮复制可能会比你要的长，但是下一轮开始，就算是目的条带了

这块没弄懂，可是模板不就是基因组dna吗？为什么会只扩增出我所需要的目的片段？

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5楼2015-10-31 13:34:22
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yuyan5210

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by ccat1994 at 2015-10-31 13:34:22
这块没弄懂，可是模板不就是基因组dna吗？为什么会只扩增出我所需要的目的片段？
...

建议亲重新学一下pcr原理
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6楼2015-10-31 16:28:04
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ccat1994

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 潇湘、西瓜匠 at 2015-10-31 13:29:34
不会的，第一轮复制可能会比你要的长，但是下一轮开始，就算是目的条带了

我好像明白了，谢谢

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7楼2015-10-31 17:13:12
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zzhjiangnan

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

循环扩增以产物为模板的时候，产物长度不是基因组的长度了
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8楼2015-11-03 19:35:47
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