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求助Northern blot 的问题
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最近做了几次northern，都失败了，膜上一片空白。我有几个问题想请教下大家。 1、电泳跑完后的转膜大家用得是什么方法？我是用得一沓纸巾压在膜上靠纸巾的吸附将RNA转到尼龙膜上，用20xSSC转膜过夜。但发现转膜效率不高，怀疑在转膜过程中膜上方的纸巾搭到了胶下的滤纸发生了短路。可是我每次搭建转移平台时都很小心，凝胶的四周也用保鲜膜封过，可转移效率还是不大好。不知大家有什么好的方法？？？ 2、紫外交联用得是UVP的紫外交联仪2000型，总照射剂量为1.5 J/cm2，不知这样的剂量是否足够是RNA交联到尼龙膜上？？？ 3、做northern时还需注意什么？？？ |
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