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xuguang09280036

新虫 (初入文坛)

[交流] 单酶切 后 连接 总连不上啊

将片段和 载体 单酶切 后 连接     筛选的都是载体自连的   也做载体的 脱磷酸化了 啊  唉 愁啊    有何高见 啊 大家  都做了一个月了
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

单酶切自连很正常 注意载体和片段的比例大概1:3就可以了 另外都要胶回收 并且你可以多挑克隆 做检测 总会有插入进去的
9楼2008-09-10 11:25:52
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)

呵呵

载体单酶切后,胶回收.
2楼2008-09-09 23:24:48
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xuguang09280036

新虫 (初入文坛)

载体用 回收吗  直接抽提  乙醇沉淀 不久好了  反正就一个片段 ,  不过我的目的片段是从另一个载体上切下来的  是胶回收的
3楼2008-09-09 23:53:41
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xipha

木虫 (正式写手)

脱磷酸化不足,建议改进。
4楼2008-09-10 08:52:23
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