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李珣隐

银虫 (正式写手)

[求助] 有关microRNA的问题

各位大神知道怎么在targetscan上如何预测某一个microRNA的靶基因?步骤越详细越好,谢谢各位了。
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执着的狼

铁杆木虫 (小有名气)

现在的TargetScan程序可以主要分三部分组成:
①主要思想是说在multiple alignment file 上寻找保守的seed match 序列可以找到functional miRNA target. 参考文献:Conserved Seed Pairing, Often Flanked by Adenosines, Indicates that Thousands of Human Genes are MicroRNA Targets seed match: reverse complimentary to miRNA Seed region, 2-7nt in miRNA 5' end, TargetScan 用multiple alignment file作为input, 寻找保守的seed match 序列, 主要考虑三种seed match的类型:7mer-1a(match seed, 而且UTR上与miRNA 1nt match的位置是A),7mer-m8(match miRNA 2-8nt), 8mer(match miRNA 2-8, 而且UTR上与miRNA 1nt match的位置是A).
②很多1.找到的target不一定会有功能,而且有很多不保守的seed match区域找到了一些有功能的miRNA target site. TargetScan根据这个想法,提出seed match周围的序列会对miRNA target的功能产生影响,所以引入了context score这个概念,主要包括site type contribution(8mer>7mer-m8>7mer-1a),3'paring contribution (有文献报道除了与miRNA seed 区域配对,与miRNA12-16nt的配对也有可能对miRNA target的功能产生影响),local AU contribution(AU rich 的区域更有可能有功能),position contribution(他们认为miRNA target的位置需要和stop coden至少有15nt的距离,而且有功能的site更有可能位于UTR的两端而不是中间,可能是因为较长UTR的中间区域有可能会形成较复杂的二级结构,影响target site accessibility, 从而影响其功能).具体cutoff参考: MicroRNA Targeting Specificity in Mammals: Determinants beyond Seed Pairing,考虑context以后,对于很多不保守的seed match region,同样可以计算相应的context score, 对保守和不保守的位点分别进行context的排序,排名靠前的(比如context score percentile > 90)是他们认为比较有可能具有功能的miRNA靶点
③Pct值的引入,参考文献:Most Mammalian mRNAs Are Conserved Targets of MicroRNAs。 主要是细化了保守型的计算,对不同的UTR分别计算其保守性 总体上说 感觉你的预测出的结果是个比较有可能的靶点, 但关预测没法保证你这个位点的功能, 最终还是需要实验的验证
细品悠然茶香,静观世事沧桑
2楼2015-10-28 20:15:47
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执着的狼

铁杆木虫 (小有名气)

本人也不是很了解,楼主可以查阅提到的文献了解具体操作步骤,希望对楼主有用。
细品悠然茶香,静观世事沧桑
3楼2015-10-28 20:19:15
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