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[求助]
关于引物问题
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| 我想在我的蛋白一端加上几个氨基酸，当时打算利用点突变的原理在引物上加入，比方说一共加入10个氨基酸，于是就在正反向引物各加5个，也就是15个碱基，这样设计出来的引物就很长了，达到了50多碱基，抱着试一试的态度进行PCR，结束之后电泳显示差不多可以，于是就以这个为模板进行下一步点突变，之后转化大肠杆菌，进行了好几次都失败了，这是什么原因呢，大伙帮忙想想 |
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