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Mr.四娃

金虫 (小有名气)

[求助] PCR点突变问题 已有1人参与

这几天一直在做点突变,设置突变一个碱基和5个氨基酸,一个一个来,第一个突变碱基之后,酶切验证是成功了,但是送去测序说是没信号,用这个做模板继续PCR也不成功,到底是哪步出问题了啊,各位帮我想想办法吧,谢谢大家了
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象牙白

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎发帖交流 2016-07-14 08:53:01
送出去之前测一下dna浓度,有可能是杂菌和你的引物不能发生特异性结合就没有信号了。
小元,加油!
2楼2016-07-13 22:33:01
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sun308686107

新虫 (初入文坛)

测序没信号是你的PCR产物浓度太低,可能是模板浓度也可能是PCR的问题
3楼2016-07-14 14:53:25
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