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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 求教毕赤酵母微孔培养
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397608492

新虫 (小有名气)

[求助] 求教毕赤酵母微孔培养 已有3人参与

由于自己课题得涉及到酵母的微孔培养，但是在微孔培养时毕赤酵母基本上不表达我的目的蛋白，我是2ml的96孔板加入500ul培养基，250rpm，30℃培养。关于毕赤酵母的微孔培养方法文献中说是以方底深孔板进行培养，但找遍了都没有方底的96孔板啊，求问谁知道有没有解决方法的？

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1楼 2015-10-28 00:46:28
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397608492

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 恶魔的左眼 at 2015-10-30 10:34:07
为什么要用微孔培养啊？用摇瓶做酵母蛋白表达也可以啊？这俩者有什么区别吗？

那没办法做高通量筛选了。

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4楼2015-10-30 12:19:07
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ainim

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
只用96孔板么？我这里有24孔矩形底深孔板，还有带挡板的24孔矩形底深孔板，有同学用来做毕赤酵母，一个课题组的有看GFP荧光的有看蛋白表达的，都挺好的。现在96孔板大部分都是圆底的啊。我还有48孔的U形底深孔板。
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刘涛...
2楼2015-10-29 13:45:55
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恶魔的左眼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
为什么要用微孔培养啊？用摇瓶做酵母蛋白表达也可以啊？这俩者有什么区别吗？
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早上一副睡不醒的样子，下午一副没睡醒的样子，晚上一副打了鸡血的样子！
3楼2015-10-30 10:34:07
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jjwhl

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

估计表达蛋白量太少，或者该酶的比酶活很低，所以才测不到酶活
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5楼2015-11-04 16:11:54
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