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新虫 (小有名气)

[求助] 求教毕赤酵母微孔培养 已有3人参与

由于自己课题得涉及到酵母的微孔培养,但是在微孔培养时毕赤酵母基本上不表达我的目的蛋白,我是2ml的96孔板加入500ul培养基,250rpm,30℃培养。关于毕赤酵母的微孔培养方法文献中说是以方底深孔板进行培养,但找遍了都没有方底的96孔板啊,求问谁知道有没有解决方法的?

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ainim

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
只用96孔板么?我这里有24孔矩形底深孔板,还有带挡板的24孔矩形底深孔板,有同学用来做毕赤酵母,一个课题组的有看GFP荧光的有看蛋白表达的,都挺好的。现在96孔板大部分都是圆底的啊。我还有48孔的U形底深孔板。
刘涛...
2楼2015-10-29 13:45:55
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恶魔的左眼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
为什么要用微孔培养啊?用摇瓶做酵母蛋白表达也可以啊?这俩者有什么区别吗?
早上一副睡不醒的样子,下午一副没睡醒的样子,晚上一副打了鸡血的样子!
3楼2015-10-30 10:34:07
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397608492

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 恶魔的左眼 at 2015-10-30 10:34:07
为什么要用微孔培养啊?用摇瓶做酵母蛋白表达也可以啊?这俩者有什么区别吗?

那没办法做高通量筛选了。

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4楼2015-10-30 12:19:07
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jjwhl

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

估计表达蛋白量太少,或者该酶的比酶活很低,所以才测不到酶活
5楼2015-11-04 16:11:54
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