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ietey

新虫 (小有名气)

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[求助] RNAi是降解特定mRNA上的一段序列还是把整段mRNA全都讲解了？已有1人参与

RT。一般进行RNA干扰的时候我们实验室一般都是合成一段21mer左右的mRNA同源核酸序列插到干扰载体里看到RNAi是由Dicer酶和RISC沉默诱导复合体介导的过程。那么被降解的一段是否只是干扰序列呢？
小弟甚是疑惑，请各位大神解答，最好有引用出处,3Q
小弟是做LncRNA这块的，干扰LncRNA据说和干扰mRNA有些不同，那么不知道有什么好的方法呢，我看文献一般都是用慢病毒进行干扰的，进行常规干扰载体插入一段shRNA的方法是否不太好呢？
还有如果是做过表达的话呢，我看到也是很多文章用的慢病毒，老板非要我查查能不能用常规载体进行过表达（主要是考虑表达效率这块，因为LncRNA有的长4k、5k的都有），大家有没有好一点的建议？不胜感激

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1楼 2015-10-27 17:35:52

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jackyoung

新虫 (正式写手)

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性别: GG
专业: 园艺学与植物营养学

通俗地讲，siRNA加载到AGO上结合目标序列造成剪切，切断的mRNA由于木有保护会受到外切核酸酶的攻击发生5'-3'或3'-5'降解，同时这些被打断的mRNA也可以造成激活机体的沉默机制，通过RDR的括增和Dicer（植物中为DCL）的剪切，产生次级的siRNA。（以上是根据植物中的过程瞎说的，动物中不得而知，勿喷。）

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