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离弦箭523

新虫 (初入文坛)

[交流] 农杆菌转化 菌斑大小不一 摇不浑

各位大神求解
8月底构建了一批农杆菌载体(菌株GV3101),先前可以摇浑(kana+gms),后来发现摇不浑,然后就重新划线,结果也不能摇浑,怀疑菌株有问题,然后就重新做电转,依然摇不浑,就重新买了感受态,就直接挑斑检测,发现PCR可以检测到阳性克隆,但是在300ML的双抗LB中却摇不浑,而且培养基上长的斑大小也不太一样。怎么破呢,郁闷中,诚恳求助
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冬至1221

新虫 (初入文坛)

先用3ml双抗LB小摇,然后再接卡娜单抗大摇试一下。。。我们一直是这么做的

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2楼2015-10-25 22:18:48
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离弦箭523

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 冬至1221 at 2015-10-25 22:18:48
先用3ml双抗LB小摇,然后再接卡娜单抗大摇试一下。。。我们一直是这么做的

现在实验室小摇1ml都会出现沉淀 没浑到一定程度的时候就开始有絮状或是白色的片状沉淀。大摇不加rif 不担心会长杂菌吗
3楼2015-10-26 10:31:52
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冬至1221

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★
离弦箭523: 金币+5 2015-10-31 22:50:42
引用回帖:
3楼: Originally posted by 离弦箭523 at 2015-10-26 10:31:52
现在实验室小摇1ml都会出现沉淀 没浑到一定程度的时候就开始有絮状或是白色的片状沉淀。大摇不加rif 不担心会长杂菌吗...

额,农杆菌很难摇的,我们摇3ml的要摇一天半,还是建议先小摇了再接大体积吧

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4楼2015-10-26 23:34:36
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次身儿

新虫 (初入文坛)

我现在也是摇不浑,时间长就会有絮状沉淀,不知道题主的问题解决了么?

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5楼2016-09-23 10:25:56
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零时以南

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 离弦箭523 at 2015-10-26 10:31:52
现在实验室小摇1ml都会出现沉淀 没浑到一定程度的时候就开始有絮状或是白色的片状沉淀。大摇不加rif 不担心会长杂菌吗...

那个白色片状物是怎么出现的?

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6楼2018-04-13 11:18:10
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