应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » 农杆菌转化 菌斑大小不一 摇不浑
61/1返回列表
查看: 3306  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

离弦箭523

新虫 (初入文坛)

[交流] 农杆菌转化 菌斑大小不一 摇不浑

各位大神求解
8月底构建了一批农杆菌载体（菌株GV3101），先前可以摇浑（kana+gms）,后来发现摇不浑，然后就重新划线，结果也不能摇浑，怀疑菌株有问题，然后就重新做电转，依然摇不浑，就重新买了感受态，就直接挑斑检测，发现PCR可以检测到阳性克隆，但是在300ML的双抗LB中却摇不浑，而且培养基上长的斑大小也不太一样。怎么破呢，郁闷中，诚恳求助
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-10-25 21:15:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冬至1221

新虫 (初入文坛)
先用3ml双抗LB小摇，然后再接卡娜单抗大摇试一下。。。我们一直是这么做的

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2015-10-25 22:18:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

离弦箭523

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 冬至1221 at 2015-10-25 22:18:48
先用3ml双抗LB小摇，然后再接卡娜单抗大摇试一下。。。我们一直是这么做的

现在实验室小摇1ml都会出现沉淀 没浑到一定程度的时候就开始有絮状或是白色的片状沉淀。大摇不加rif 不担心会长杂菌吗
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2015-10-26 10:31:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冬至1221

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★
离弦箭523: 金币+5 2015-10-31 22:50:42
引用回帖:
3楼: Originally posted by 离弦箭523 at 2015-10-26 10:31:52
现在实验室小摇1ml都会出现沉淀 没浑到一定程度的时候就开始有絮状或是白色的片状沉淀。大摇不加rif 不担心会长杂菌吗...

额，农杆菌很难摇的，我们摇3ml的要摇一天半，还是建议先小摇了再接大体积吧

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2015-10-26 23:34:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

次身儿

新虫 (初入文坛)
我现在也是摇不浑，时间长就会有絮状沉淀，不知道题主的问题解决了么？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
5楼2016-09-23 10:25:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

零时以南

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 离弦箭523 at 2015-10-26 10:31:52
现在实验室小摇1ml都会出现沉淀 没浑到一定程度的时候就开始有絮状或是白色的片状沉淀。大摇不加rif 不担心会长杂菌吗...

那个白色片状物是怎么出现的？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2018-04-13 11:18:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 离弦箭523 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +5 yunziaaaaa 2026-03-01 6/300 2026-03-01 23:57 by ccp273206157
[考研] 材料学硕318求调剂 +11 February_Feb 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:53 by ccp273206157
[考研] 一志愿郑大材料学硕298分，求调剂 +5 wsl111 2026-03-01 5/250 2026-03-01 23:45 by 暮雨星晴
[考研] 材料化工调剂 +12 今夏不夏 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:32 by L135790
[考研] 江苏省农科院招调剂1名 +3 Qwertyuop 2026-03-01 3/150 2026-03-01 23:18 by aaadim
[基金申请] 成果系统访问量大，请一小时后再尝试。---NSFC啥时候好哦，已经两天这样了 +4 NSFC2026我来了 2026-02-28 4/200 2026-03-01 22:37 by 铁门栓
[考研] 0856调剂 +5 刘梦微 2026-02-28 5/250 2026-03-01 22:30 by wang_dand
[考研] 高分子化学与物理调剂 +6 好好好1233 2026-02-28 12/600 2026-03-01 19:48 by 好好好1233
[考研] 298求调剂 +6 axyz3 2026-02-28 6/300 2026-03-01 19:00 by 18137688336
[考研] 0856材料求调剂 +11 hyf hyf hyf 2026-02-28 12/600 2026-03-01 18:57 by 18137688336
[考研] 295求调剂 +7 19171856320 2026-02-28 7/350 2026-03-01 18:54 by 18137688336
[考研] 290求调剂 +9 材料专硕调剂； 2026-02-28 11/550 2026-03-01 17:21 by sunny81
[考研] 281求调剂 +4 2026计算机_诚心 2026-03-01 7/350 2026-03-01 17:20 by 2026计算机_诚心
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +4 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 7/350 2026-03-01 16:52 by caszguilin
[考研] 285求调剂 +8 满头大汗的学生 2026-02-28 8/400 2026-03-01 16:47 by caszguilin
[考研] 307求调剂 +5 wyyyqx 2026-03-01 5/250 2026-03-01 15:21 by Fff-1
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭