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飞蓬万里

新虫 (初入文坛)

[交流] 所谓实验条件和细胞状态 对实验结果重复性的影响 已有1人参与

众所周知 生物实验的重复性很不好,一般大家都是怎么分析重复不出来上次结果的原因的?
实验条件?比如说细胞状态?
请问细胞状态是怎么影响实验结果的。
我有一次收数据的时候 实验组细胞先长满的 我就提了蛋白,后来对照组才长满的,又收了对照组的蛋白。这样先后两次收的蛋白进行western检测。
但是我师姐说这样不对,应该把两组细胞状态调齐了一起收蛋白。请问我就不明白了 这个调齐细胞状态是什么个意思?
比如我想检测几个cell cycle相关的基因的表达。那么需要怎样处理对照组 和实验组 的细胞,在什么状态下提取蛋白呢?

ps:一般咱们看文献,从来实验材料和方法部分不写细胞的状态 (解冻养几天做检测,长到多慢满收蛋白),只写做检测的步骤,不写检测前的细胞处理和状态,
尤其是一些大牌的杂志。这导致我们对他们结果的重复很难。

实验室老师和师兄师姐从来只教怎么做western PCR 至于这些之前的细胞质量控制从来不讲,他们似乎也对这个很朦胧。但是我所谓的一些实验检测技术其实很简单,
而检测的样品的处理则真正决定了实验的重复性 和能不能反映真实状况。
可惜的是咱们的实验从来很少重视这个,大家也不谈论或教学这个。
想借小木虫的平台讨论下。
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新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
确实,养细胞这个就是凭个人经验
2楼2015-11-02 19:45:12
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