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飞蓬万里

新虫 (初入文坛)

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专业: 细胞周期与调控

[交流] 所谓实验条件和细胞状态对实验结果重复性的影响已有1人参与

众所周知生物实验的重复性很不好，一般大家都是怎么分析重复不出来上次结果的原因的？
实验条件？比如说细胞状态？
请问细胞状态是怎么影响实验结果的。
我有一次收数据的时候实验组细胞先长满的我就提了蛋白，后来对照组才长满的，又收了对照组的蛋白。这样先后两次收的蛋白进行western检测。
但是我师姐说这样不对，应该把两组细胞状态调齐了一起收蛋白。请问我就不明白了这个调齐细胞状态是什么个意思?
比如我想检测几个cell cycle相关的基因的表达。那么需要怎样处理对照组和实验组的细胞，在什么状态下提取蛋白呢？

ps：一般咱们看文献，从来实验材料和方法部分不写细胞的状态（解冻养几天做检测，长到多慢满收蛋白），只写做检测的步骤，不写检测前的细胞处理和状态，
尤其是一些大牌的杂志。这导致我们对他们结果的重复很难。

实验室老师和师兄师姐从来只教怎么做western PCR 至于这些之前的细胞质量控制从来不讲，他们似乎也对这个很朦胧。但是我所谓的一些实验检测技术其实很简单，
而检测的样品的处理则真正决定了实验的重复性和能不能反映真实状况。
可惜的是咱们的实验从来很少重视这个，大家也不谈论或教学这个。
想借小木虫的平台讨论下。

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