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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR胶图过宽是怎么回事啊
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hxxzhz

铜虫 (小有名气)

[求助] PCR胶图过宽是怎么回事啊 已有1人参与

请大家看一下这个胶图，marker条带很清晰，为什么PCR产物的条带那么宽呢。
我用的是1%的胶，点了5ul产物，150V电压。
谢谢！

PCR胶图过宽是怎么回事啊
20151023 跑22号做的PCR 血片  全血-2_副本.jpg
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努力做一件事情。。。
1楼 2015-10-23 17:38:52
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懒蛋

铁杆木虫 (著名写手)
pcr 产物太多了呗，几个cycle？

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向钱看，向厚赚
2楼2015-10-26 00:04:15
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懒蛋

铁杆木虫 (著名写手)
30个cycle 2ul 就够了

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向钱看，向厚赚
3楼2015-10-26 00:04:49
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hcf321283

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hxxzhz: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2015-11-11 14:08:22
若果DNA质量还可以的话，我建议你做PCR时加入的模板时控制在25ng左右 ，循环数30cycle足够！
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4楼2015-10-26 10:19:54
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hcf321283

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by hcf321283 at 2015-10-26 10:19:54
若果DNA质量还可以的话，我建议你做PCR时加入的模板时控制在25ng左右 ，循环数30cycle足够！

根据你的条带大小，电泳上样的时候2ul样品，1.5%琼脂糖胶.120V 半小时足够啦
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5楼2015-10-26 10:22:33
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hxxzhz

铜虫 (小有名气)
我调整了了上样量，加了3ul产物，用2*loading buffer ，好多了 谢谢！
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努力做一件事情。。。
6楼2015-11-11 14:02:53
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z631535213

木虫 (正式写手)
学习了
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7楼2015-11-11 14:32:14
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