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zyf902527新虫 (初入文坛)
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牛精子蛋白提取
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最近在做二维电泳,在裂解蛋白时出了问题:(1)用尿素盐酸胍的方法裂解牛精子,沉淀蛋白不溶解,尿素裂解液(7M的尿素、2M硫脲、4%CHAPS、1mM EDTA、65mM DTT),2M的盐酸胍(1.9g盐酸胍、0.05g Tris、1mM EDTA、10ml蒸馏水),溶解蛋白的溶解液是和尿素裂解液一样。 (2)用TCA-丙酮沉淀后的牛精子蛋白,蛋白呈黄色的,也是不能完全溶解,溶解液也是用尿素裂解液。 我在网上看到有用超声助溶的,加热的25℃过夜的,往TCA-丙酮沉淀后的牛精子蛋白里加上0.2M的氢氧化钠1ul,或往尿素盐酸胍裂解的沉淀蛋白里加β-ME,都试过了,还是不见蛋白溶解,这是怎么回事呀? 急求各位师姐师兄的帮助,谢谢! |
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zyf902527
新虫 (初入文坛)
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3楼2016-03-02 11:52:08













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