| 查看: 1336 | 回复: 2 | ||
zyf902527新虫 (初入文坛)
|
[求助]
牛精子蛋白提取
|
|
最近在做二维电泳，在裂解蛋白时出了问题：（1）用尿素盐酸胍的方法裂解牛精子，沉淀蛋白不溶解，尿素裂解液（7M的尿素、2M硫脲、4%CHAPS、1mM EDTA、65mM DTT），2M的盐酸胍(1.9g盐酸胍、0.05g Tris、1mM EDTA、10ml蒸馏水)，溶解蛋白的溶解液是和尿素裂解液一样。 （2）用TCA-丙酮沉淀后的牛精子蛋白，蛋白呈黄色的，也是不能完全溶解，溶解液也是用尿素裂解液。 我在网上看到有用超声助溶的，加热的25℃过夜的，往TCA-丙酮沉淀后的牛精子蛋白里加上0.2M的氢氧化钠1ul,或往尿素盐酸胍裂解的沉淀蛋白里加β-ME，都试过了，还是不见蛋白溶解，这是怎么回事呀？ 急求各位师姐师兄的帮助，谢谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样
已经有9人回复
-
是这周出结果还是下周出结果？
已经有3人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有4人回复
-
应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键
已经有27人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有3人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有4人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有7人回复
cory0931
至尊木虫 (文坛精英)
巫山云
- 应助: 28 (小学生)
- 贵宾: 0.101
- 金币: 30045.4
- 散金: 13879
- 红花: 198
- 帖子: 10480
- 在线: 1003.9小时
- 虫号: 1652657
- 注册: 2012-02-29
- 性别: GG
- 专业: 临床兽医学
2楼2015-12-13 20:30:52
zyf902527
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 191.5
- 散金: 70
- 帖子: 32
- 在线: 7.6小时
- 虫号: 3484961
- 注册: 2014-10-19
- 性别: MM
- 专业: 蛋白质组学
3楼2016-03-02 11:52:08
100