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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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zyf902527

新虫 (初入文坛)

[求助] 牛精子蛋白提取

最近在做二维电泳,在裂解蛋白时出了问题:(1)用尿素盐酸胍的方法裂解牛精子,沉淀蛋白不溶解,尿素裂解液(7M的尿素、2M硫脲、4%CHAPS、1mM EDTA、65mM DTT),2M的盐酸胍(1.9g盐酸胍、0.05g Tris、1mM EDTA、10ml蒸馏水),溶解蛋白的溶解液是和尿素裂解液一样。
(2)用TCA-丙酮沉淀后的牛精子蛋白,蛋白呈黄色的,也是不能完全溶解,溶解液也是用尿素裂解液。
我在网上看到有用超声助溶的,加热的25℃过夜的,往TCA-丙酮沉淀后的牛精子蛋白里加上0.2M的氢氧化钠1ul,或往尿素盐酸胍裂解的沉淀蛋白里加β-ME,都试过了,还是不见蛋白溶解,这是怎么回事呀?
急求各位师姐师兄的帮助,谢谢!
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暖暖
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cory0931

至尊木虫 (文坛精英)

巫山云

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锤之千古
2楼2015-12-13 20:30:52
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zyf902527

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cory0931 at 2015-12-13 20:30:52
我师妹好像是做过,毕业了;
师兄也做过……
精子蛋白本来就不好溶的吧;

谢谢啦!
暖暖
3楼2016-03-02 11:52:08
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