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oceanworld

木虫 (小有名气)

[求助] 核受体蛋白与激素的体外结合检验 已有1人参与

通过文献了解某个核受体与某激素在生物体内可以结合,现在想在体外进行核受体蛋白与激素的结合检验,从而证明该受体蛋白能够与该激素结合,不知大家有没有相应的实验方法进行这方面的实验?非常感谢
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dengqiong301

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我做过,但是不知道对你是否有帮助。
我们采用的方法是构建核受体蛋白载体,转染进某一不表达该受体蛋白的细胞;后裂解细胞,取细胞蛋白与放射性标记的激素共孵育一段时间,以活性木炭处理吸出未被结合的激素,如果放射性读数高于背景值,则表明蛋白与激素结合。[原理是蛋白与激素形成的复合体无法被活性木炭吸附。]
2楼2015-10-22 13:29:00
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