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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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足下客

木虫 (正式写手)

[求助] 肠道病毒样本溶在生理盐水中,保存在-80度冰箱里,冻融一次会导致病毒RNA降解吗?

有没有人保存过临床病人的病毒样本?实验室有个肠道病毒的样本溶在生理盐水中,放在-80度冰箱里。之前用全自动核酸提取仪抽提核酸后,再做荧光定量PCR,效果很好。前两天取出来,我重新用全自动核酸提取仪抽提,竟然啥也没扩出来。刚开始是怀疑自己核酸提的有问题,因为我没用过这种核酸提取仪和试剂盒,后来又用预装板提了一次,将板子放到机器中时,有同事在旁边看着,确认我没放错,程序也没设错,结果做荧光PCR,还是没扩出来?
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tolobio

新虫 (小有名气)


RNA很容易降解的。我们一般都是把样本用液氮先冻下,然后再放-80,可以放得比较久些。如果中间有冻融的话,肯定是不能用来做RNA了。这种最好就是在保持之前就分成几份。
2楼2015-10-20 07:01:59
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许彦

木虫 (正式写手)

主要是生理盐水没有办法抑制rna降解

发自小木虫Android客户端
3楼2015-10-20 07:43:08
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足下客

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by tolobio at 2015-10-20 07:01:59
RNA很容易降解的。我们一般都是把样本用液氮先冻下,然后再放-80,可以放得比较久些。如果中间有冻融的话,肯定是不能用来做RNA了。这种最好就是在保持之前就分成几份。

我们主管说病毒RNA比较稳定,像临床上的粪便样本,含病毒的,都是离心后取上清,溶解在生理盐水中的。跟组织中RNA不一样。
4楼2015-10-20 08:02:46
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tolobio

新虫 (小有名气)


引用回帖:
4楼: Originally posted by 足下客 at 2015-10-20 08:02:46
我们主管说病毒RNA比较稳定,像临床上的粪便样本,含病毒的,都是离心后取上清,溶解在生理盐水中的。跟组织中RNA不一样。...

(⊙o⊙)哦。之前没做过啊,不好意思。
5楼2015-10-20 08:36:05
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