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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 肠道病毒样本溶在生理盐水中，保存在-80度冰箱里，冻融一次会导致病毒RNA降解吗？
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足下客

木虫 (正式写手)

[求助] 肠道病毒样本溶在生理盐水中，保存在-80度冰箱里，冻融一次会导致病毒RNA降解吗？

有没有人保存过临床病人的病毒样本?实验室有个肠道病毒的样本溶在生理盐水中，放在-80度冰箱里。之前用全自动核酸提取仪抽提核酸后，再做荧光定量PCR，效果很好。前两天取出来，我重新用全自动核酸提取仪抽提，竟然啥也没扩出来。刚开始是怀疑自己核酸提的有问题，因为我没用过这种核酸提取仪和试剂盒，后来又用预装板提了一次，将板子放到机器中时，有同事在旁边看着，确认我没放错，程序也没设错，结果做荧光PCR，还是没扩出来？
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1楼 2015-10-19 16:46:23
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tolobio

新虫 (小有名气)
RNA很容易降解的。我们一般都是把样本用液氮先冻下，然后再放-80，可以放得比较久些。如果中间有冻融的话，肯定是不能用来做RNA了。这种最好就是在保持之前就分成几份。
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2楼2015-10-20 07:01:59
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许彦

木虫 (正式写手)
主要是生理盐水没有办法抑制rna降解

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3楼2015-10-20 07:43:08
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足下客

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by tolobio at 2015-10-20 07:01:59
RNA很容易降解的。我们一般都是把样本用液氮先冻下，然后再放-80，可以放得比较久些。如果中间有冻融的话，肯定是不能用来做RNA了。这种最好就是在保持之前就分成几份。

我们主管说病毒RNA比较稳定，像临床上的粪便样本，含病毒的，都是离心后取上清，溶解在生理盐水中的。跟组织中RNA不一样。
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4楼2015-10-20 08:02:46
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tolobio

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 足下客 at 2015-10-20 08:02:46
我们主管说病毒RNA比较稳定，像临床上的粪便样本，含病毒的，都是离心后取上清，溶解在生理盐水中的。跟组织中RNA不一样。...

(⊙o⊙)哦。之前没做过啊，不好意思。
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5楼2015-10-20 08:36:05
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