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chenfun

[交流] 液相色谱峰拖尾该如何解决?

HPLC分析样品,峰出现拖尾,通常改变哪些色谱条件以改善峰型呢?
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chenmeijuan

木虫 (正式写手)

o ,huida zhenhao
4楼2008-09-08 22:19:51
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kelg

荣誉版主 (知名作家)

优秀版主

这人很懒,什么都没留下:)
2楼2008-09-06 18:43:38
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lixingyu

木虫 (正式写手)


wingcat(金币+1,VIP+0):谢谢
减小进样量;改变洗脱剂;根据分析对象的性质,加入缓冲溶液。
3楼2008-09-06 21:10:33
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nhuzwj

金虫 (小有名气)

★ ★
dnp(金币+2,VIP+0):谢谢~~
峰拖尾的可能原因及解决方法如下:
1. 柱超载:降低样品量 , 增加柱直径采用较高容量的固定相
2.峰干扰:清洁样品 , 调整流动相
3.硅羟基作用:如果对照品是偏酸性的,流动相加0.1%醋酸;如果对照品是偏碱性的,流动相应加少量三乙胺。
4.柱内烧结不锈钢失效:更换烧结不锈钢 , 加在线过滤器 , 过滤样品
5.柱塌陷或形成短路通道:更换色谱柱 , 采用较弱腐蚀性条件
6.死体积或柱外体积过大:连接点降至最低 , 对所有连接点作合适调整 , 尽可能采用细内径的连接管
7.柱效下降:用较低腐蚀条件 , 更换柱 , 采用保护柱
8.保护柱污染:把保护柱拆卸下来 箭头向上在水里超声一下,然后把管路在不接柱子的情况下用1:1二甲基亚酚水溶液清洗,以确保没有管路的洁净。
9.样品问题:弱酸弱碱物质的解离。
10.流动相:是否干净,是否产生微生物。
11.样品制备:样品制备方法是否得当。
12.色谱柱污染:a.解决办法:采用异丙醇约20倍以上柱体积冲洗。
       b.对于蛋白质污染:使用1%乙酸溶液再生。
       c.重金属污染:使用1%EDTA溶液过柱络合后除去。
       d.非可溶性杂质:将分析柱和保护柱分别倒装(一次洗一个)后低流速冲洗,如果还不行 只能将柱头筛板和保护柱芯卸下来倒置超声一下。
13.缓冲盐缓冲能力不够:加入缓冲溶液。
5楼2008-09-08 22:52:39
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