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液相色谱峰拖尾该如何解决？
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| HPLC分析样品，峰出现拖尾，通常改变哪些色谱条件以改善峰型呢？ |
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kelg
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lixingyu
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4楼2008-09-08 22:19:51
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dnp(金币+2,VIP+0):谢谢~~
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峰拖尾的可能原因及解决方法如下： 1. 柱超载：降低样品量 , 增加柱直径采用较高容量的固定相 2.峰干扰：清洁样品 , 调整流动相 3.硅羟基作用：如果对照品是偏酸性的，流动相加0.1％醋酸；如果对照品是偏碱性的，流动相应加少量三乙胺。 4.柱内烧结不锈钢失效：更换烧结不锈钢 , 加在线过滤器 , 过滤样品 5.柱塌陷或形成短路通道：更换色谱柱 , 采用较弱腐蚀性条件 6.死体积或柱外体积过大：连接点降至最低 , 对所有连接点作合适调整 , 尽可能采用细内径的连接管 7.柱效下降：用较低腐蚀条件 , 更换柱 , 采用保护柱 8.保护柱污染：把保护柱拆卸下来 箭头向上在水里超声一下，然后把管路在不接柱子的情况下用1：1二甲基亚酚水溶液清洗，以确保没有管路的洁净。 9.样品问题：弱酸弱碱物质的解离。 10.流动相：是否干净，是否产生微生物。 11.样品制备：样品制备方法是否得当。 12.色谱柱污染：a.解决办法：采用异丙醇约20倍以上柱体积冲洗。 b.对于蛋白质污染：使用1%乙酸溶液再生。 c.重金属污染：使用1%EDTA溶液过柱络合后除去。 d.非可溶性杂质：将分析柱和保护柱分别倒装（一次洗一个）后低流速冲洗，如果还不行 只能将柱头筛板和保护柱芯卸下来倒置超声一下。 13.缓冲盐缓冲能力不够：加入缓冲溶液。 |
5楼2008-09-08 22:52:39