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上官abc

金虫 (正式写手)

王下七武海

[求助] 有做过双向电泳的进来聊聊啊

LZ最近需要做双向电泳,用的是从植物组织中提取的蛋白质,可是没做过等电聚焦电泳。而且提取的蛋白样品也不清楚是直接在离心后取上清-80℃冷藏 还是 真空冷凝干燥以粉末状保存。SDS-PAGE也和平时跑电泳时不同,毕竟等电聚焦后的IPG胶条在SDS时要用到。
当然现在最想了解的是蛋白质的保存状态,是上清还是干粉?小伙伴在哪?求支援
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学术茹

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
1楼: Originally posted by 上官abc at 2015-10-17 21:12:51
LZ最近需要做双向电泳,用的是从植物组织中提取的蛋白质,可是没做过等电聚焦电泳。而且提取的蛋白样品也不清楚是直接在离心后取上清-80℃冷藏 还是 真空冷凝干燥以粉末状保存。SDS-PAGE也和平时跑电泳时不同,毕竟 ...

冻干粉的意义主要在于浓缩样品浓度,易于保存,如果你蛋白达到双向电泳要求浓度就可以直接上样,越少步骤对蛋白完整越好

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2楼2015-11-14 15:51:46
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a1838

新虫 (初入文坛)

样品处理要脱盐,尽量用水溶解蛋白样品。

发自小木虫Android客户端
3楼2015-11-14 23:29:32
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徐晓婷

新虫 (初入文坛)

你好,我最近也需要从黄瓜做双向电泳,我也是初学者,你能不能先从蛋白提取上给我点建议,或是把你具体的操作步骤之类的共享一下,谢谢
4楼2016-03-28 17:02:33
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MarchZR

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 徐晓婷 at 2016-03-28 17:02:33
你好,我最近也需要从黄瓜做双向电泳,我也是初学者,你能不能先从蛋白提取上给我点建议,或是把你具体的操作步骤之类的共享一下,谢谢

不知道是否有用,可以看看:双向凝胶电泳步骤:http://www.detaibio.com/topics/shuang-xiang-ning-jiao-dian-yong.html
5楼2016-03-28 17:34:08
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