| 查看: 2457 | 回复: 12 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
923158905铜虫 (小有名气)
|
[求助]
二相代谢孵育体系溶液配制 已有1人参与
|
|
|
想请教些问题，我做的是葡萄糖醛酸化反应，关于孵育体系的配制，我需要配制四种溶液A（UDPGA）；B(D-葡萄糖二酸1,4-内酯，丙甲菌素，MgCl2)；C（样品溶液）；D（UGT酶溶液），然后将溶液冷冻分装，使用时溶解移取适量体积，使孵育体系总体积为100 uL。 （1）UDPGA不太稳定，是不是不可以配成溶液长期冷冻保存，要现配现用？配成溶液冷冻保存有什么影响？ （2）我能把B溶液和D溶液配制在一起，作为一个溶液吗？ （3）我只知道反复冻融对酶的活性有影响，所以要将酶溶液分装成小份以减少冻融次数，但其他的溶液（A,B,C)还需要分装成小份进行保存吗? （4）丙甲菌素在水中的溶解性怎样啊？可以直接用缓冲液配制吗？ 谢谢大家！ |
回复此楼» 猜你喜欢
博导推荐
已经有2人回复
-
哪里做甘氨酸受体与配体结合率的试验
已经有0人回复
-
药物学论文润色/翻译怎么收费?
已经有195人回复
-
广西医科大学基础医学院自身免疫病课题组招收基础医学、药学和生物学等专业的研究生
已经有7人回复
-
[学习资料分享] FAERS数据库的不良反应挖掘(频数法/贝叶斯法)
已经有1人回复
-
招收医学、基础医学类调剂研究生
已经有0人回复
-
是否属于脾肾阳虚证
已经有0人回复
-
关于SCI杂志发表挂名
已经有32人回复
-
广西医科大学基础医学院自身免疫病课题组招收基础医学相关专业的调剂研究生
已经有2人回复
3楼2015-10-19 08:51:31
923158905
铜虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1374.6
- 红花: 1
- 帖子: 98
- 在线: 64.4小时
- 虫号: 2518924
- 注册: 2013-06-23
- 专业: 生物化工与食品化工
2楼2015-10-18 10:31:03
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
923158905: 金币+30, ★★★很有帮助, 谢谢你的帮助，回答的好详细，赞一个~\(≧▽≦)/~ 2015-10-19 21:46:02
感谢参与，应助指数 +1
923158905: 金币+30, ★★★很有帮助, 谢谢你的帮助，回答的好详细，赞一个~\(≧▽≦)/~ 2015-10-19 21:46:02
|
(1)UDPGA要现配现用。如果你真的要配成溶液冷冻，建议挑几个对照化合物，做一下验证实验，看看冷冻后是否有影响。 2）不建议配在一起 3）最好都配成小份，冻存。 (4）丙甲菌素在书中溶解性一般。建议配在DMSO等有机相，配成高浓度，实验时取少量加到反应体系。 PS.做科研，最好每一步都严格按要求来，否则一旦有问题，很难分析原因。如果想节省步奏，改变条件，一定要先做验证实验。 还有个问题，如果你用的是基因工程技术生成的UGT酶，应该就不需要丙甲菌素了吧。我们用microsomes做实验，才加丙甲菌素，目的是穿孔，让UGT释放出来。 |
4楼2015-10-19 15:11:21
923158905
铜虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1374.6
- 红花: 1
- 帖子: 98
- 在线: 64.4小时
- 虫号: 2518924
- 注册: 2013-06-23
- 专业: 生物化工与食品化工
5楼2015-10-19 15:41:21
10