| 查看: 1934 | 回复: 8 | |||
Stridegogogo捐助贵宾 (小有名气)
小可爱
|
[求助]
大神帮忙看，SDS-PAGE检测此重组表达蛋白（酶）基本都在沉淀里，上清会否有酶活？ 已有4人参与
|
请大神帮我看看，第一条带是marker，第二三四条带分别是空载体的全菌上清沉淀，后三条带，分别是 重组蛋白破碎后的全菌 上清 沉淀。我感觉蛋白都在沉淀里，基本上清理完全没有，我表达的是一个酶，但是理论上上清里应该也是含有的啊，但是我没有检测到活性，大家遇到这种情况都是怎么做，用上清还是包涵体复性？ 未命名图片.png |
回复此楼» 猜你喜欢
科研孤儿太难了
已经有15人回复
-
让我中一个面上吧！
已经有10人回复
-
言之凿凿，明天官网会通知放榜？
已经有17人回复
-
时间戳又变了
已经有17人回复
-
今天系统多次维护，明天很可能放榜！
已经有11人回复
-
时间戳变了，能看出什么问题？
已经有23人回复
-
只有每年这种时候来逛逛小木虫
已经有22人回复
-
放榜前的不淡定
已经有12人回复
-
重要消息，中午系统在维护
已经有12人回复
-
今天基金会出结果吗？20260819
已经有15人回复
ls5940
铁虫 (初入文坛)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 4289.3
- 帖子: 20
- 在线: 6.6小时
- 虫号: 2180455
- 注册: 2012-12-11
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
你这张图说明你这个酶是胞内且不可溶或者包涵体过分表达。你用上清并不起任何作用。我建议你低温诱导，比如16度。这样有可能不会过分折叠。可能会出现在上清中。 发自小木虫IOS客户端 |
2楼2015-10-17 09:12:26
Stridegogogo
捐助贵宾 (小有名气)
小可爱
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 14
- 帖子: 74
- 在线: 21.9小时
- 虫号: 3443522
- 注册: 2014-09-23
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
3楼2015-10-17 14:38:36
ls5940
铁虫 (初入文坛)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 4289.3
- 帖子: 20
- 在线: 6.6小时
- 虫号: 2180455
- 注册: 2012-12-11
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
Stridegogogo: 金币+5, ★有帮助 2015-10-20 11:54:36
Stridegogogo: 金币+5, ★有帮助 2015-10-20 11:54:36
|
换一个宿主细胞再试试。如果还是不行，就得尝试换载体，或者尝试包涵体复性吧。 发自小木虫IOS客户端 |
4楼2015-10-17 22:14:46
感谢参与，应助指数 +1
|
本帖内容被屏蔽 |
5楼2015-10-17 22:23:51
6楼2015-10-20 11:25:05
ganchao1776
至尊木虫 (职业作家)
- 应助: 18 (小学生)
- 金币: 11638.1
- 散金: 1811
- 红花: 30
- 帖子: 3407
- 在线: 900.8小时
- 虫号: 330935
- 注册: 2007-03-24
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
7楼2015-10-20 13:12:50
8楼2015-10-20 17:48:34
Stridegogogo
捐助贵宾 (小有名气)
小可爱
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 14
- 帖子: 74
- 在线: 21.9小时
- 虫号: 3443522
- 注册: 2014-09-23
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
9楼2015-10-22 19:15:43
