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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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sdjnyxn123

银虫 (小有名气)

[求助] 请问同源克隆跟RACE得到的片段拼接的时候,有几个不同的碱基,应该以哪一个为准?

请问同源克隆跟RACE得到的片段拼接的时候,有几个不同的碱基,应该以哪一个为准?
对照着看了一下重合的部分,有这几个碱基不一样,最后翻译的氨基酸也有一个不一样(苯丙氨酸和亮氨酸)

请问这种情况下该看哪一个啊···

当时没计较,直接用5RACE保的菌拿来设计引物构建载体了,结果目的基因一直就是RACE的那个,有一个碱基不一样,万一不对怎么办啊?
也不知道是测序的问题还是发生突变了

提交genebank,写文章和论文的时候该以哪个为准呢?
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hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)

如果你要提交序列的话,我建议在没有争议的位置重新设计引物,高保真酶扩增,测序。一方面验证序列,一方面验证拼接是否正确。因为之前的序列保真性都不高,而且不同个体的序列也有可能不同。

发自小木虫Android客户端
2楼2015-10-14 08:12:22
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