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蛋白小王子6

银虫 (小有名气)

[交流] 请高手虫子帮我分析一下为什么GADHP跑成了这样?多谢 已有2人参与

各位虫友,
是这样的,本来二抗应该孵育一个小时, 我有点事情,就室温孵育完之后,4度又孵育了5个小时。然后我担心背景值太高,就洗了2个小时。结果GADPH 就发成了这样;
我有两个问题问问虫友。
1.粗的那个条带是GADPH,不过怎么曝光那么白?
2.下面那个发大很好的双带时怎么回事啊?
多谢虫友
顺祝
  台安
/Users/kangtianshu/Desktop/GADPH Ser-1.jpg

请高手虫子帮我分析一下为什么GADHP跑成了这样?多谢
GADPH Ser-1.jpg
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读书也不必只读纸做的书,山水可以读,云雨可以读,官场可以读,商界可以读,赌徒和妓女也是书,只在家读书,读了书还是书,无异于整日喝酒、打牌和吸烟土。
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蛋白小王子6

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 314300420 at 2015-10-13 08:54:31
一抗浓度太高了,提高稀释度就没问题了

戳中软肋,确实GADPH一抗为1:1500稀释。多谢多谢。

发自小木虫IOS客户端
读书也不必只读纸做的书,山水可以读,云雨可以读,官场可以读,商界可以读,赌徒和妓女也是书,只在家读书,读了书还是书,无异于整日喝酒、打牌和吸烟土。
10楼2015-10-14 00:33:57
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查看全部 12 个回答

蛋白小王子6

银虫 (小有名气)

不好意思 题目答错了 是GADPH
读书也不必只读纸做的书,山水可以读,云雨可以读,官场可以读,商界可以读,赌徒和妓女也是书,只在家读书,读了书还是书,无异于整日喝酒、打牌和吸烟土。
2楼2015-10-12 12:08:15
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
蛋白小王子6: 金币+4 2015-10-14 00:14:16
孵育时间过长导致底物过快消耗掉,所以不黑反白,在你刚加上去一两秒钟底物就消耗没了,
底下的条带是抗体非特异性结合的条带也有可能是少量降解造成,还是因为抗体孵育时间太长,把平时看不到或者比较浅的条带都显出来了
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
3楼2015-10-13 01:59:15
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314300420

捐助贵宾 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
蛋白小王子6: 金币+1 2015-10-14 00:19:37
蛋白小王子6: 金币+1, 戳中软肋,确实GADPH一抗为1:1500稀释。多谢多谢。 2015-10-14 00:20:40
一抗浓度太高了,提高稀释度就没问题了
4楼2015-10-13 08:54:31
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