24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1252  |  回复: 7
当前主题已经存档。

speculiar

银虫 (小有名气)

[交流] 请教PCR产物直接测序的问题

下午做了胶回收,习惯性用试剂盒配带的elution buffer溶解的。。。。
请问elution buffer会不会影响测序呀?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

speculiar

银虫 (小有名气)

啊~google到了。会影响
2楼2008-09-04 21:26:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

看看你的elute buffer是什么
如果是Tris,不怕,TE可能就有问题
3楼2008-09-04 21:32:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

speculiar

银虫 (小有名气)

网上说elution buffer里面一般含有EDTA,所以应该会影响的。只好明天做纯化了

还有请问大家做胶回收一般得率有多高?真的象试剂盒介绍吹的那样99%?
4楼2008-09-04 22:49:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户

很多试剂盒都会在说明书中说明洗脱缓冲液对下一步反应的影响,确实,如果EDTA多了的话是会对下一步实验有影响,但现在的试剂盒基本都不会对下一步实验有什么影响了。
金币是赌出来的
5楼2008-09-05 14:06:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wul1984

金虫 (正式写手)

lz可以让公司测一下,反正测不出来又不收费!感觉应该影响不会很大!毕竟用于测序的样品量很少,里面的EDTA就更少了!
6楼2008-09-05 15:48:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxlxyc

铜虫 (小有名气)

用灭菌蒸馏水溶解最好。测序反应也是Taq酶的聚合反应,需要一个最佳的酶反应条件。如果DNA用缓冲液溶解后,在进行测序反应时,DNA溶液中的缓冲液组份会影响测序反应的体系条件,造成Taq酶的聚合性能下降。
7楼2008-09-07 09:59:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

胶回收率就要看你用的试剂盒质量了 好的公司的一般都没有问题 像TaKara Promega都可以 不要图省钱 国产的一般回收率都不高
8楼2008-09-07 12:44:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 speculiar 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂推荐 材料 304 +12 荷包蛋hyj 2026-03-26 12/600 2026-03-27 14:46 by laoshidan
[考研] 291求调剂 +11 hhhhxn.. 2026-03-23 16/800 2026-03-27 14:14 by hhhhxn..
[考研] 一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂 +8 vv迷 2026-03-22 8/400 2026-03-27 13:09 by 253863592
[考研] 一志愿211,335分,0856,求调剂院校和导师 +4 倾____萧 2026-03-27 5/250 2026-03-27 11:52 by zhshch
[考研] 求调剂 +3 刘柯@ 2026-03-24 4/200 2026-03-27 11:28 by shangxh
[考研] 材料求调剂 +8 @taotao 2026-03-21 8/400 2026-03-27 11:21 by wangjy2002
[考研] 一志愿哈尔滨工业大学材料与化工方向336分 +3 辰沐5211314 2026-03-26 3/150 2026-03-27 10:24 by 尽舜尧1
[考研] 329求调剂 +7 钮恩雪 2026-03-25 7/350 2026-03-27 04:28 by wxiongid
[考研] 327求调剂 +7 prayer13 2026-03-23 7/350 2026-03-26 20:48 by 不吃魚的貓
[考研] 0703化学求调剂 +3 丹青奶盖 2026-03-26 5/250 2026-03-26 20:11 by macy2011
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +10 纸鱼ly 2026-03-21 11/550 2026-03-24 17:22 by qingfeng258
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 求调剂 +7 十三加油 2026-03-21 7/350 2026-03-23 23:48 by 热情沙漠
[考研] 328求调剂 +4 LHHL66 2026-03-23 4/200 2026-03-23 14:55 by lbsjt
[考研] 276求调剂 +3 YNRYG 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:31 by 醉在风里
[考研] 293求调剂 +3 涛涛Wjt 2026-03-22 5/250 2026-03-22 22:21 by jiangpengfei
[考研] 石河子大学(211、双一流)硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 材料与化工(0856)304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
信息提示
请填处理意见