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求助镍柱亲和层析高手指点
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在大肠杆菌中高表达一个6HIS标签融合蛋白,为包涵体形式,溶于6M尿素缓冲液(pH8.0,含咪唑5mM)后,进行镍柱亲和层析,发现从一开始上样,其上样流出液中即有很少的标签蛋白渗漏现象,请问这样正常吗?标签蛋白的挂柱率可以达到100%吗?图中泳道2中最浓的那条为标签蛋白,泳道3-9均为上样时流出液 图片1副本.png |
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